人血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒

应用原理操作步骤

人血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒性质、用途与生产工艺

应用人血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附法（ELISA）检测样本中血管内皮细胞生长因子(VEGF)的含量。
原理往预先包被人血管内皮细胞生长因子（VEGF）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的人血管内皮细胞生长因子（VEGF）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；
4. 随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

人血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒上下游产品信息

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