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MS1小鼠胰岛内皮细胞

描述培养步骤

MS1小鼠胰岛内皮细胞

CAS号:
英文名:MS1 mouse islet endothelial cells
中文名:MS1小鼠胰岛内皮细胞
CBNumber:CB55528360
分子式:
分子量:0
MOL File:Mol file

MS1小鼠胰岛内皮细胞性质、用途与生产工艺

描述 MS1小鼠胰岛内皮细胞是1994年建株的胰岛内皮细胞株。原代培养的胰岛内皮细胞用抗G418的温度敏感型SV40大T抗原(tsA-58-3)转染。抗性克隆用克隆环分离，并筛选吸收dil-Ac-LDL的。这株细胞保留了内皮细胞的许多特性，如吸收乙酰化LDL和表达八因子相关抗原及BEGF受体。

MS1小鼠胰岛内皮细胞
培养步骤
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，进行离心收集，1000RPM条件下离心8-10分钟，去除上清，按冻存数量加入血清及DMSO，冻存比例为90%FBS+10%DMSO。