EHA101 ELECTRO感受态细胞
- CAS号:
- 英文名:EHA101 ELECTRO competent cells
- 中文名:EHA101 ELECTRO感受态细胞
- CBNumber:CB54809277
- 分子式:
- 分子量:0
- MOL File:Mol file
EHA101 ELECTRO感受态细胞性质、用途与生产工艺
- 背景 EHA101菌株为C58型背景，核基因中含有筛选标签——利福平抗性基因rif，为了便于转化操作，此菌株携带一无自身转运功能的胭脂碱型Ti质粒pEHA101 (pTiBo542DT-DNA)，此质粒含有vir基因 (vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件，pEHA101 (pTiBo542DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。pEHA101 (pTiBo542DT-DNA) 型Ti质粒含有筛选标签：kan，赋予EHA101菌株卡那霉素抗性，适用于玉米、水稻、烟草等植物的转基因操作。
- 制备方法 1.0.1 cm电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上5分钟，待其沥干水分，正置5分钟，使乙醇充分挥发，待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面0.5 cm以方便盖上杯盖，冰中静置5分钟充分降温。 2.取-80℃保存的农杆菌感受态插入冰中5分钟，待其融化，加入1-5μg质粒DNA（质粒体积不大于6ul，最好用试剂盒抽提，双蒸水溶解），用手拨打管底混匀，立即插入冰中，用200μl枪头将感受态-质粒混合物快速移到电击杯中，盖上杯盖，空管保留待用。 3.启动电转仪，设置参数：C=25μF，PC=200 ohm，V=2400 V（此参数为Biorad推荐，使用者也可按所用电转仪推荐的protocol操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中，加入700μl无抗生素的LB并转移到感受态空管中，28℃振荡培养2~3小时。 4.6000 rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的LB或YEB平板上，倒置放于28℃培养箱培养2-3天
- 应用 EHA101 Electro感受态细胞可用于植物基因克隆转化研究，EHA101侵染能力最强；棉花胚性愈伤组织与菌株EHA101共培养4d可以获得满意的转化瞬时表达效果。
EHA101 ELECTRO感受态细胞上下游产品信息
上游原料
下游产品
EHA101 ELECTRO感受态细胞生产厂家
- 公司名称：上海联迈生物工程有限公司
- 联系电话：--
- 电子邮件：shlmai@163.com
- 国家：中国
- 产品数：6699
- 优势度：58
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