Glycogen PAS stain (for fungi)

近年来, 糖原染色应 用的范围更加广泛, 如用以证明与鉴别细胞内空泡状的性质, 心肌病变及其他心血管疾病的诊断, 糖原累积病诊断和研究, 糖尿病的诊断和研究, 用于某些 肿瘤的诊断等。除用于糖原的鉴定和黏液的显示外, 还可以观察肾小球基底膜、结肠杯状细胞中性黏 液物质、阿米巴滋养体和霉菌的着色。临床诊断、分 类和治疗提供了重要的依据。

糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方 面:

• 尽可能选取小块新鲜组织及时固定。糖原易溶 于水, 在酶的作用下很容易分解葡萄糖, 更易溶于 水, 固定之前决不能用水或生理盐水等浸洗。应避 免用水溶性固定液, 宜采用酒精性固定液, 如Carnoy 液, 能较好地保存糖原, 但有使糖原流动到细胞一侧 的现象, 多数人认为是由于固定剂把细胞内的糖原 推向固定剂对组织浸透的方向而造成。
• 其他组织应用中性福尔马林固定为佳。组织在4℃左右温度内 固定与保存, 是针对糖的性质和避免糖原溶于水而 采取的相应措施。
• 乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白, 亦能 核蛋白和糖原沉淀, 但仍可溶于水, 因此最好不单独使用乙醇固定, 以乙醇为溶剂的混合固定液固定为佳。
• Schiff氏染液的配制是关键, 尤其是偏重亚硫 酸钠的质量, 打开应是粉剂, 且带有硫的气味, 若成 团或没有气味, 则不能用, 配制时使用的容器、药勺、 称药天平与称药纸等必须洁净、无污染。
• PAS 染色时需于暗处加盖反应, 染色时间10 ～ 20 min(染 色时间长短取决于试剂的质量和环境温度, SO浓度 高, 染色时间适当缩短;环境温度高, 染色时间也应 适当缩短, 反之则需适当延长反应时间。
• 染色过程 中不能接触伊红, 以免造成颜色误差。作糖原染 色时, 最好作消化对照, 即取两张连续切片, 其中一张脱蜡至水后, 用1%淀粉酶于37℃消化30 min, 水 洗后与不经消化处理的切片一起置0.5%高碘酸液 氧化, 如经消化处理的切片染色阴性, 不经消化处理 的切片染色阳性, 即肯定为糖原。