五胜肽

胜肽（peptide）即小分子的蛋白质，又称多肽或肽，它是由具有一定序列的氨基酸通过酰胺键相连，2个氨基酸组成的叫二胜肽，3个氨基酸组成的叫三胜肽，依次。肽在生物的生长、发育和代谢中起着重要作用。人体内的各种生理进程几乎都是由特定的氨基酸序列组成的多肽或蛋白质调控的。在皮肤自然老化和护理过程中，胜肽起着重要的作用，如细胞增殖、细胞迁移、炎症、血管发生、色素形成以及蛋白合成及调控等。

据调查发现，目前被国外著名品牌采用频率最高的几款胜肽为：棕榈酰五肽-3（五胜肽）、乙酰基六肽-3、乙酰基四肽-5、棕榈酰寡肽（棕榈酰三肽-1）、棕榈酰四肽-3和肌肽等，这几种美容胜肽被各个品牌采用的搜索结果均超过500条，足见其应用广泛。

五胜肽只有13个氨基酸，分子量小，容易被吸收。它的一个显著作用是可以促进胶原蛋白增生，间接修复人体口腔粘膜的微损伤。五胜肽的抗衰老作用，可以防止和改善牙龈萎缩。另外，五胜肽可以促进透明质酸和弹力纤维增生，能有效激活玻尿酸合成，这对保持口腔水分，缓解口干至关重要。

1.Fmoc-Ser(tBu)-WangResin的制备

把1.71gWangResin投入到反应柱中，DMF洗涤一次，抽干；用适量干燥二氯甲烷常温溶涨，N₂吹拂搅拌30min至树脂充分溶胀，抽干液体；DMF洗涤一次，抽干；重蒸DMF洗涤一次，抽干。加入3.07gFmoc-Gly-OH、1.30gHOBt、1.49mlDIC的DMF/DCM(1：1)溶液5ml。反应5min后，加入0.10gDMAP，反应4h。反应结束后，抽干反应液，用DMF洗涤三次抽干，取出少许树脂进行替代度检测。随后加入200ml封闭试剂(AC₂O/吡啶(7：6，V：V))，反应8-16h，DMF洗涤2次；无水甲醇洗两次(10min/次)，真空减压干燥至恒重。测得Fmoc-Ser(tBu)-WangResin的替代度为0.71mmol/g。

2.Matrixyl-WangResin的制备

1）在Fmoc-Ser(tBu)-WangResin反应柱中，加入DCM溶涨20-30min，抽掉。加入DBLK溶液(哌啶/DMF(V/V)=1：4)脱保护2次(5+10min)，两次脱保护之间需加入DMF洗涤1min，抽掉。两次脱完保护抽掉后再用DMF，甲醇，DCM，DMF，各洗涤1次，用玻璃棒挑取少许树脂，茚检，显深紫红色，表明Fmoc已脱，待投料。

2）在脱保护的过程中，称取0.93gFmoc-Lys(Boc)-OH和0.81gHOBt置烧杯中，加入2ml精制DMF溶解，待完全溶解后，将烧杯放入冰浴中冷却2min，然后再加入0.93mlDIC于溶液中活化8min，若出现白色絮状泡沫表明活化已完全，用布氏漏斗将活化液中的白色固体小颗粒滤去，将得到的澄清滤液倒入反应柱中，再加入DMF于反应柱中，调节好N₂，使树脂被均匀吹起，套上干燥管，并要保持在反应过程中无挂壁现象出现，若出现挂壁，用少许精制DMF将壁上的树脂冲到反应液中。室温反应2h，茚检合格后可抽掉反应液继续连接下一个氨基酸。

3.Matrixyl-WangResin的裂解

将干燥至恒重的MatrixylWangResin0.10g置于玻璃烧瓶中，冰浴搅拌下加入TFA-苯甲硫醚-苯甲醚-EDT(体积比95：5：3：2)4ml，反应30min，逐渐升至室温，于室温下反应2h。过滤，用少许TFA洗涤树脂，将滤液倾入40ml无水冰乙醚中，析出白色固体，4000rpm离心4min，弃去上清液，重复2次，真空干燥，得粗肽46.6mg。

4.Matrixyl粗肽的分析鉴定

粗品Matrixyl进行RPHPLC分析，纯化后Matrixyl的HPLC-ESI-MS分析可知其m/z402.3{[M+H]2+}，Matrixyl的分子量为802.05，理论值与实际值相符。