RM-10
- CAS号:
- 英文名:RM-10
- 中文名:RM-10
- CBNumber:CB45530234
- 分子式:
- 分子量:0
- MOL File:Mol file
RM-10性质、用途与生产工艺
- 用途 人慢性髓原白血病细胞是由Lozzio从一名53岁的慢性髓细胞性白血病急变期的女性患者的胸水中分离建立的,是对自然杀伤细胞高度敏感的体外靶标,故而被广泛应用于这方面的研究。
- 细胞来源 慢性髓系白血病(CML),俗称慢粒,是一种骨髓造血干细胞克隆性增殖形成的恶性肿瘤,其实质为9号染色体上C-ABL原癌基因移位至22号染色体,即t(9;22)(q34;q11),并在分子水平上导致BCR-ABL融合基因形成,其编码的p210BCR-ABL蛋白具有极强的酪氨酸激酶活性,使一系列信号弹发发生持续性磷酸化,影响细胞的增值分化、凋亡及粘附,导致CML的发生。
- 细胞复苏 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
-
细胞传代
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.收到细胞后首次传代推荐将细胞悬液按1:2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中,建议冻存一支备用,后续传代根据实际情况按1:2到1:5的比例进行。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。
RM-10上下游产品信息
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