SHZ-88大鼠乳腺癌细胞

简介细胞复苏传代方法

SHZ-88大鼠乳腺癌细胞性质、用途与生产工艺

简介 SHZ-88大鼠乳腺癌细胞源自DMBA诱导的大鼠乳房癌。大多数细胞是上皮细胞样的，也可以见到巨大细胞团和病态有丝分裂；电镜下可见细胞表面和桥粒上有微丝。第3天的有丝分裂指数是59%。移植到同源动物中可以成活。培养基；90%RPMI-1640+10%胎牛血清+1%双抗。
细胞复苏
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
传代方法
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

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