通用细胞冻存液(无血清)

通用细胞冻存液(无血清)主要由培养基、DMSO 等组成，不含血清，是一种经典的无菌冻存液。用于各种哺乳动物原代细胞、传代细胞系、杂交瘤细胞等的冻存。
细胞冷冻的原理在于尽可能降低细胞内的晶体形成，减少细胞内水凝固所形成的高浓度溶质对细胞造成的低温损伤，从提高细胞复苏时的存活率。细胞冻存的数量应保证复苏时低温保护剂获得稀释，稀释后的细胞浓度扔高于正常传代的细胞浓度为宜，这是因为当低温保护剂稀释以后，该浓度一般不会对细胞造成毒性损伤。

1、培养细胞至对数生长晚期，显微镜观察其外观、形态、有无污染等，取状态良好的细胞进行冻存操作。如为贴壁生长细胞，用胰蛋归酶消化并用完全培养基终止消化，进行细胞计数;如为悬浮生长细胞，进行细胞计数。
2、离心，弃上清。
3、加入适量的通用细胞冻存液，重悬细胞，使细胞浓度达到/ml，置于冻存管中，密闭、不要拧的太紧，避免弯曲变形。
4、一般进行冷冻。亦可采用-20°C 30min, -70°C 过夜，最后置于液氮罐中长期存储。