人Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA KIT
- CAS号:
- 英文名:Human C-telopeptide of type Ⅰ collagen,CTX-Ⅰ ELISA Kit
- 中文名:人Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA KIT
- CBNumber:CB33347862
- 分子式:
- 分子量:0
- MOL File:Mol file
人Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA KIT性质、用途与生产工艺
- 应用 人Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA KIT应用双抗体夹心法测定人血清,血浆及相关液体标本中人Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)的水平。
- 原理 用纯化抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入抗体,再与HRP标记的抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品浓度。
-
实验操作
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100ul,余孔分别加标准品或待测样品100ul,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液100ul(取1ul检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350ul/每孔,甩干。
4.每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液)100ul,37℃,60分钟。
5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350ul/每孔,甩干。
6.依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.依序每孔加终止溶液50ul,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后15分钟以内进行检测。
人Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA KIT上下游产品信息
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人Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA KIT生产厂家
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