细胞复苏 细胞传代 细胞冻存

RT4

RT4,,结构式
RT4
  • CAS号:
  • 英文名:RT4
  • 中文名:RT4
  • CBNumber:CB32988310
  • 分子式:
  • 分子量:0
  • MOL File:Mol file
RT4化学性质
  • 储存条件 :-196°C

RT4性质、用途与生产工艺

  • 细胞复苏 将含有1 mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10 cm皿中,加入约8 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
  • 细胞传代

    RT4细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

    a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

    b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,弃去消化液,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

    c、按6-8 mL/瓶补加培养基,轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心4 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。

    d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。

  • 细胞冻存

    RT4细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;

    a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。

    b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。

    c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

RT4上下游产品信息
上游原料
下游产品
RT4生产厂家
  • 公司名称:上海沪震实业有限公司
  • 联系电话:021-60345367 13916550749
  • 电子邮件:sales@shzbio.com
  • 国家:中国
  • 产品数:9965
  • 优势度:58