虎红琼脂培养基

蛋白胨在培养基中作为营养物质提供菌体生长所需氮源等；葡萄糖作为能源；磷酸盐作为缓冲剂；镁盐促进菌体细胞的生长；孟加拉红可抑制细菌的生长，也可限制繁殖快的霉菌菌落的大小和高度，此外还作为着色剂，霉菌或酵母菌吸收后便于菌落的观察；氯霉素为抗生素可抑制细菌的生长；琼脂作为凝固剂。

用法：称取本品36.6g,加热溶解于1000ml纯化水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟备用。

1、称取孟加拉红培养基31.6g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌20min。

2、无菌操作称取检样25克(或25mL)，放入含有225mL灭菌水的玻璃三角瓶中，振摇30min，即为1：10稀释液，依次做1：100、1：1000……稀释。

3、根据对样品污染情况的估计，选择2—3个合适的稀释度，分别在做10倍稀释的同时，吸取1mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做2个平皿。

4、将凉至45℃左右的培养基注入平皿中，待琼脂凝固后，倒置于25—28℃温箱中培养。

5、3d后开始观察结果，共培养观察5d。

6、计算方法：通常选择菌落数在10—150之间的平皿进行计数(如食品卫生国家标准)，也有选用5—50个之间的平皿进行计数(化妆品卫生规范)，同稀释度的2个平皿菌落平均数乘以稀释倍数，即为每克(或每mL)检样中所含霉菌和酵母菌数。