简介 细胞复苏 细胞传代

H4细胞

H4细胞,,结构式
H4细胞
  • CAS号:
  • 英文名:H4 cell
  • 中文名:H4细胞
  • CBNumber:CB15534781
  • 分子式:
  • 分子量:0
  • MOL File:Mol file

H4细胞性质、用途与生产工艺

  • 简介 H4细胞建系于1973年;它衍生于一个患神经胶质瘤的37岁病人的脑组织。H4细胞的致瘤特性己经被屏蔽,细胞接种动物一般不产生肿瘤结节。H4细胞具有修复MNNG损伤5型腺病毒的能力。
  • 细胞复苏 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
  • 细胞传代 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

    1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

    2.加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。

    3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

    4.按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

    3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,进行离心收集,1000RPM条件下离心8-10分钟,去除上清,按冻存数量加入血清及DMSO,冻存比例为90%FBS+10%DMSO。

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