T-47D人乳腺管癌细胞

简介培养步骤

T-47D人乳腺管癌细胞性质、用途与生产工艺

简介
T-47D人乳腺管癌细胞分离自一位54岁乳房侵入性导管癌的女性患者胸水；发现分化的上皮亚株(T-47D)有细胞质连接和17-β-雌二醇及其他类固醇降血钙素的受体，T-47D细胞表达WNT7B癌基因。

T-47D人乳腺管癌细胞
培养步骤
培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基；优质胎牛血清，10%；添加0.01mg/ml胰岛素；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

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