应用 实验原理 实验操作

人细胞周期素D2(CYCLIN-D2)ELISA试剂盒

人细胞周期素D2(CYCLIN-D2)ELISA试剂盒,,结构式
人细胞周期素D2(CYCLIN-D2)ELISA试剂盒
  • CAS号:
  • 英文名:Human Cyclin D2 (CYCLIN-D2) ELISA Kit
  • 中文名:人细胞周期素D2(CYCLIN-D2)ELISA试剂盒
  • CBNumber:CB05529650
  • 分子式:
  • 分子量:0
  • MOL File:Mol file

人细胞周期素D2(CYCLIN-D2)ELISA试剂盒性质、用途与生产工艺

  • 应用 人细胞周期素D2(CYCLIN-D2)ELISA试剂盒用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内细胞周期素D2(CYCLIN-D2)的含量检测。
  • 实验原理 人细胞周期素D2(CYCLIN-D2)ELISA试剂盒是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(elisa)。往预先包被人细胞周期素D2(Cyclin-D2)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人细胞周期素D2(Cyclin-D2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
  • 实验操作

    1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

    2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

    3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

    4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

    5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

    6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

    7.温育:操作同3。

    8.洗涤:操作同5。

    9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

    10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

    11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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