2104005-17-4

Cyanine7.5 is a NIR fluorescent dye. This reagent contains free amino group which can be used coupled with activated carboxylic acid derivatives.

Cy7.5 (Cyanine 7.5) 是一种发近红外（NIR）荧光的花青素荧光染料。Cy7.5的荧光波长很长，发射峰（Em max）大于800nm，恰好处于肌体组织近红外窗口 I 的区域（肌体的血液，体液和组织此区域背景荧光弱，而长波长穿透性强），所以Cy7.5的标记物常应用于小动物活体体内成像中。Cy7.5可以用来标记蛋白，抗体，多肽等。另外，由于近红外荧光背景低，Cy7.5标记的二抗常常用于荧光蛋白免疫印迹(Western Blot)。
胺基(primary amine)是生物标记反应中常用的基团。蛋白表面赖氨酸侧链(residue)官能团就是伯氨基，伯胺基可以和NHS活化酯(N-羟基琥珀酰亚胺酯，N-hydroxysuccinimide ester，succinimidyl ester)，异氰酸酯(isothiocyanate, ITC)或其它活化基团反应生成稳定链接，从而把Cy7.5分子连接到目标分子上。
Cy7.5-伯胺的水溶性较低，所以在水相的标记反应体系内需要使用有机共溶剂，常用有机溶剂包括DMF，DMSO和乙腈等。如需标记的分子对有机溶剂敏感，可选择磺化花青素（sulfonated cyanine），即磺化-Cy7.5-伯胺。两者的光谱性质几乎一致，因此大部分应用可相互替换。两者的主要区别在于：磺化染料是水溶性的，在水相的标记反应体系内不需要使用有机共溶剂，并且降低染料在水中聚集的可能性，增强标记效率。
Cy7.5-伯胺标记后的产物Ex/Em是788/808nm。和它具有相似荧光特性的染料包括Alexa Fluor 790，DyLight 800，吲哚菁绿(indocyanine green, ICG)等。

• Cy7.5-伯胺水溶性较低，标记反应可在有机溶剂中进行或者含有机助溶剂的水相中进行。
• 标记时使用不含氨基的缓冲体系，比如磷酸钠缓冲液（PBS），Hepes缓冲液，碳酸氢钠缓冲液；或硼酸缓冲液等。不要使用任何含伯胺或仲胺的缓冲液，比如Tris，甘氨酸等，它们会和Cy7.5上的伯胺竞争。高浓度咪唑(imidazole)也会影响反应。
• 标记反应不要放在强光下，因为大部分荧光化合物在强光下长时间照射会缓慢光漂泊(photobleaching)。