肌酐酶的主要应用

背景及概述^[1]

肌酐肌酸脱去一个分子水缩合而成。肌酐生成后由肾小球过滤从尿中排出，是衡量肾小球功能的重要指标。血浆肌酐浓度决定于生成率和排除率，前者与肌酸及磷酸肌酸的代谢有关，后者与肾小球的过滤功能有关，因其被滤过后不再被肾小管重吸收，因此对肾脏功能的评估比尿素氮更特异。常用碱性苦味酸法测定。目前已有特异性好，更适于自动化的酶学测定的商品试剂盒供应，并已开始推广。参考值(血清)：苦味酸法　27～71μmol/L；酶法　3～54μmol/L(男)，44～97μmol/L(女)。肌酐升高见于肾功能不全、严重肌肉损伤、肌营养不良等；降低常见于甲状腺机能低下及肝硬化等。。

应用^[2-4]　

目前肌酐酶法的测定主要有两种，一种是监测肌酐亚氨水解酶偶联谷氨酸脱氢酶变化的酶动力学测定，另一种为肌酐氨基水解酶偶联肌氨酸氧化酶和过氧化物酶发生Trinder反应的酶动力学测定。其中，后者由于试剂价格相对较低，不受血氨和其他干扰物的影响，目前已有大量的商品试剂盒供应。

1）用于制备一种抗羟苯磺酸钙药物干扰的人血清中肌酐含量检测试剂，包括R1试剂和R2试剂，所述R1试剂包括3?吗啉丙磺酸、TOOS、Brij?35、庆大霉素、肌氨酸氧化酶、肌酸酶、维生素氧化酶和硫酸联氨，所述R2试剂包括3?吗啉丙磺酸、4?AAP、肌酐酶、Proclin300和亚铁氰化钾。本发明通过配制R1试剂和R2试剂，使用时采用具有双试剂功能的全自动生化分析仪，利用双试剂终点法进行测定，保证检测数据的准确性，同时通过在R1中加入硫酸联氨来有效消除羟苯磺酸钙药物干扰，保证临床肌酐试剂检测的准确性，能够实现线性范围宽、抗羟苯磺酸钙药物干扰能力强、稳定性好、准确度高的肌酐酶法检测。

2）用于测定肌酐含量。该试剂盒包括缓冲液、辅酶、肌酐酶、肌酸酶、肌氨酸氧化酶、醛脱氢酶、稳定剂，通过将样品与试剂按一定的体积比混合，使之发生酶偶联反应，再将最终反应物置于生化分析仪下，检测主波长吸光度变化的情况(速度)，从而测算出肌酐的含量。采用本发明完全可以通过生化分析仪器得出所需的测定结果，并且灵敏度高、精确度好，不受内外源物质的污染，便于推广应用。

3）用于制备一种酶法测定血清中肌酐含量的检测试剂盒，包含试剂R1和试剂R2；所述试剂R1含有3~10g/LpH7.5~8.0的缓冲液、0.2~0.5g/LEDTA、0.5~2g/LN-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)间甲苯胺钠盐、1‰~5‰表面活性剂、0.2~1g/L肌氨酸氧化酶、1~5KU/L抗坏血酸氧化酶、2~5KU/L肌酸酶和0.5~1g/L稳定剂；所述试剂R2含有3~10g/LpH7.5~8.0的缓冲液、0.1~0.5g/L4-氨基安替比林、0.1~0.4g/L高铁氰化钾、2~8g/L肌酐酶、1~6KU/L过氧化物酶和0.5~2g/L防腐剂。本发明稳定佳，抗干扰强，有较高临床应用价值。

主要参考资料

[1] 协和医学词典

[2] CN201810317204.6一种抗羟苯磺酸钙药物干扰的人血清中肌酐含量检测试剂

[3] CN200410065167.2肌酐含量测定方法及肌酐诊断试剂盒

[4] CN201410401289.8酶法测定血清中肌酐含量的检测试剂盒