丙二酰染料木苷的检测

背景及概述^[1]

在大豆中主要存在九种异黄酮糖苷，其中大豆苷(Daidzin)，染料木苷(Genistin)，丙二酰大豆苷(Malonyl‑daidzin) 和丙二酰染料木苷(Malonyl‑genistin)的含量最多。丙二酰染料木苷具有调节雌激素、抑制与癌相关的酶的活性，消除活性氧基，具有抗氧化作用及防治骨质疏松症等功效。

检测^[1]

异黄酮的提取方法：称取大豆粉末100mg，加入到10ml试管，加入70‑80％乙醇2‑4ml， 振荡器振荡10‑20秒后，室温下超声波超声15分钟，遮光静置30分钟后，5速 2,500转/分钟离心10分钟后，取上清液取1ml移入1.5ml的eppendorf离心管， 13,000转/分钟，离心5分钟，上清液400‑500μl装入HPLC专用小瓶，进行HPLC 的异黄酮分析。

HPLC分析标准方法：

采用YMCODS.AM‑RP(250x30mm，5pm)分析柱，进样量为5μl，移动相 由A(0.1％醋酸水溶液V/V)和B(0.1％醋酸乙睛溶液V/V)组成，采用梯度洗脱。 梯度为：0～60mni，B由10％线性递增至60％，后用90％B洗脱3min，最后10％B 平衡10min。紫外检测波长为254nm。洗脱速度0.65ml/min，柱温40℃。如图6 所示：在14‑17min时大豆苷(Daidzin)被检出，在24‑25min时染料木苷(genistin) 被检出，26‑27时丙二酰大豆苷被检出，在34‑36min时丙二酰染料木苷被检出。 在53‑55min时染料木黄酮被检出。图6检出的峰均为标准物质的峰，而不是从大豆子叶中检出的峰，所以峰面比较好看，染料木黄酮在大豆种子一般含量较低，少量试样较难检测到。

主要参考资料

[1] CN201010191832.8 植物营养成分含量的快速提取检测法