测定依诺肝素钠中残留苄索氯铵的方法

依诺肝素钠是一种低分子肝素钠盐，为多组分物质。以猪粘膜肝素为起始原料，经肝素季铵盐制备、肝素苄酯的制备、对肝素苄酯进行碱解聚、以酸中和、醇沉淀，精制、脱色，脱水干燥，得到依诺肝素钠成品。在依诺肝素钠的制备过程中，添加苄索氯铵，在成品质量控制中应当对其残留进行限度检测^[1]。

困难

依诺肝素钠中，苄索氯铵作为杂质，含量非常低，在用常规的检测方法对其检测时，由于高浓度的依诺肝素钠的影响，苄索氯铵很容易检测不出来，依诺肝素钠的干扰较严重。因此很有必要提供一种专属性强，灵敏度高，精密度良好，准确度高、耐用性好、结果稳定可靠的依诺肝素钠中苄索氯铵的测定方法。

检测参数

采用高效液相色谱法进行分析检测，以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以乙腈和辛烷磺酸钠-磷酸溶液体系为流动相，检测波长为210～230nm，进行高效液相色谱法分析检测。

样品制备

对照品溶液制备：将适量苄索氯铵加入20％乙腈配制成含苄索氯铵浓度为0.5～2μg/mL的对照品溶液。本发明20％乙腈是乙腈水溶液中乙腈的体积份数为20％。

供试品溶液制备：将依诺肝素钠溶解在20％乙腈中，配制成含依诺肝素钠浓度为20mg/mL的供试品溶液。

供试品+对照品溶液制备：将适量依诺肝素钠和苄索氯铵溶解在20％乙腈中，配制供试品+对照品溶液。

方法优势

此方法操作简单，专属性好，重复性和耐用性好，检测限达到0.102ng，灵敏度高，可有效检测依诺肝素钠中残留苄索氯铵，从而可用于依诺肝素钠的质量控制，为依诺肝素钠产品质量提供保障。

参考文献

[1] 依诺肝素钠中苄索氯铵的测定方法. CN111458419A