木犀草素的作用

背景

木犀草素是一种很具有代表性的天然黄酮，在植物界分布较广，主要存在于金银花、菊花中，以糖苷的形式分布于芹菜、紫苏叶及花生的外壳、忍冬等。木犀草素从乙醇离析出的为含一个结晶水的金黄色针状体，微溶于热水，难溶于冷水。水溶液呈悦目的淡黄色，可溶于10%氢氧化钠水溶液，呈深黄色，木犀草素在正常条件下稳定。木犀草素具有多种药理活性，如消炎、抗过敏、降尿酸、抗肿瘤、抗菌、抗病毒等，临床主要用于止咳、祛痰、消炎、降尿酸、治疗心血管疾病、治疗“肌萎缩性脊髓侧索硬化症”，SARS，肝炎等。但目前未见木犀草素用于防治神经炎症相关疾病的报道。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种木犀草素的应用，该木犀草素可以显著抑制神经炎症的活性。

神经炎症主要表现为小胶质细胞激活，小胶质细胞内炎症因子大量释放，TLR4信号通路的激活，同时伴随记忆损伤和认知功能障碍。

本发明提供了木犀草素在制备抑制小胶质细胞激活药物中的应用。

优选地，所述药物用于抑制所述小胶质细胞中炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达。

优选地，所述药物用于抑制所述小胶质细胞中NO信号分子的产生。

本发明采用NO试剂盒检测木犀草素对LPS诱导的小鼠小胶质细胞NO的释放的影响。结果表明木犀草素可显著抑制小胶质细胞的激活和小胶质细胞中NO的释放。

本发明还提供了木犀草素在制备阻断TLR4信号通路药物中的应用。

本发明中，优选阻断TLR4信号通路下游的Myd88蛋白、NF-Kb蛋白和/或MAPK蛋白的表达，因而木犀草素可以阻断Toll样受体4(TLR4)信号通路。

本发明还提供了木犀草素在制备抑制神经炎症药物中的应用。

优选地，所述神经炎症为脂多糖诱导的神经小胶质细胞炎症。

本发明还提供了木犀草素在制备预防或治疗神经退行性疾病药物中的应用。

优选地，所述神经退行性疾病选自：老年痴呆、帕金森或多发性硬化症。

优选地，所述药物还包括药学上可接受的辅料。

优选地，所述药物的剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、悬浮剂、分散剂、糖浆剂或注射剂。

从以上技术方案可以看出，本发明具有以下优点：

本发明提供了木犀草素的应用，由实验结果可知，木犀草素可以抑制LPS诱导的小胶质细胞的激活，显著抑制小胶质细胞内NO信号分子的产生，小胶质细胞和TLR4信号通路下游炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达。因此，木犀草素可以显著抑制神经炎症活性，可用于制备预防或治疗神经退行性疾病药物，具有临床应用价值和开发前景。

图1为本发明实施例1不同浓度的木犀草素对细胞活力的影响图；

图2为本发明实施例2不同浓度的木犀草素抑制LPS诱导小胶质细胞内NO的抑制率。

具体实施方式

为使得本发明的发明目的、特征、优点能够更加的明显和易懂，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，下面所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而非全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明实施例BV-2细胞购买于国家实验细胞资源共享平台，木犀草素购买于四川省维克奇生物科技有限公司，NO试剂盒购于碧云天试剂公司，LPS购于Sigma-Aldrich。

本实施例采用MTT法考察不同浓度的木犀草素对小鼠小胶质细胞的活力的影响。

(1)小鼠小胶质细胞系BV-2的培养

细胞培养液以DMEM为基础，加入10％FBS、1％双抗(青霉素和链霉素)配置。小鼠小胶质细胞系BV-2培养在5％CO2，37℃的细胞培养箱中，定期在显微镜下观察细胞生长情况，当细胞贴壁面积约占培养瓶的70％-80％时，用胰酶消化细胞并传代，之后继续培养。

(2)细胞活力测定

实验原理：活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜(Formazan)并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲臜，用酶联免疫检测仪在540或720nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。

检测方法：取对数生长期的BV2细胞，将细胞接种于96孔板内，细胞密度为5000/well，接种量为100ul/well，置于培养箱内。24小时后，取出96孔板，弃去上清液，按实验组分组，分别换成无血清的DMEM培养液配置的不同浓度木犀草素(25μM、50μM、100μM、200μM)来孵育细胞，同时设置对照孔(对照组未加入木犀草素)和调零孔(TL)，每组设置6个复孔，置于培养箱中孵育24h。24小时后取出96孔板，弃去上清液，避光加mtt溶液(浓度0.5mg/ml)，每孔100ul，然后在放入培养箱培养4小时。4h后，终止培养，小心吸走孔内培养液，每孔加入150ul DMSO，把板子前后左右摇晃数次，用酶标仪测试在570nm的波长处光吸收值，并计算细胞活力。

如图1所示，木犀草素(MXC)在浓度为100μM及以下时，对细胞活力无影响，因此可选择100μM及以下药物浓度，进行药效验证。