5-羟基色胺的检测方法

发布日期:2023/12/13 9:20:48

简介

5-羟基色胺（5-HT）又叫血清素（serotonin）‚是一种杂环胺，分子式为C10H12N2O（分子量为176∙2）‚由Ersparmer和Vialli在1937年首次分离。5-羟基色胺广泛存在于自然界动植物中。水果、蔬菜、坚果等都含有5-羟基色胺无脊椎动物和脊椎动物组织中也发现了。哺乳动物除骨骼肌、外周神经和肾上腺不含外，几乎遍布其他器官组织。人体内5-羟基色胺主要存在于胃肠道粘膜的嗜铬细胞‚约占总量的80％‚其余的主要分布在血小板[1]。

图1 5-羟基色胺的性状

检测方法

5-羟基色胺的测定方法有荧光测定法、薄层层析法、放射免疫法（radioimmunoassay‚RIA）、放射酶法、气相色谱法（gas chromatography‚GC）、气相色谱-质谱串联法（gas chromatography-mass spectro-graphy‚GC-MS）、高效液相色谱法（high pressureliquid chromatography‚HPLC）、液相色谱-质谱串联法（LC-MS）等。高效液相色谱法由于其高灵敏度、高特异性、样品用量小、干扰因素少、可同时测定5-羟基色胺及其相关吲哚物等特点受到研究人员的青睐。目前国内外5-羟基色胺、5-HIAA的研究普遍应用HPLC。对于荧光光度法而言，5-羟基色胺与邻苯二甲醛（OPT）在强酸条件下加热反应生成荧光复合物荧光光度计检测。本法操作繁琐、灵敏度低、特异性差、但仪器要求稍低。而对于HPLC而言，HPLC测5-羟基色胺有紫外法、荧光法和电化学法用得较多的是荧光法和电化学法。因为羟吲哚类物质在300 nm左右有最大吸收波长‚340 nm左右有最大发射波长。利用5-羟基色胺的自然荧光检测早有报道。该法较电化学法简便‚技术要求低，可同时检测5-HT、5-HIAA、5-HTP、Trp等物质。pH值对荧光有影响，受影响最大的是5-HIAA。该物质在pH为7时发射波长为330 nm。在强酸条件下发射波长为550 nm，而激发波长并无变化。pH对5-羟基色胺的影响较小[2]。