去乙酰基车叶草苷酸的应用

背景及概述^[1][2]

白花蛇舌草为茜草科植物白花蛇舌草Hedyotisdiffusa Willd.的干燥全草，研究表明该植物主要含有黄酮类、三萜类、蒽醌类、环烯醚苷萜类、多糖类等成分，具有抗肝炎、抗肿瘤、抗病毒、抗炎抑菌、调血脂及降血糖等多种药理活性。去乙酰基车叶草苷酸是其活性成分，具有多种生理作用。

结构

应用^[2-3]

在研究白花蛇舌草中发现，白花蛇舌草药材和注射液中均含有较高量的环烯醚萜成分去乙酰基车叶草苷酸和鸡屎藤次苷。研究表明，环烯醚萜苷具有抗氧化、抗炎、免疫调节等生物活性。其应用举例如下：

1）制备一种维生素D受体激动剂，该激动剂包括：水晶兰苷、去乙酰基车叶草苷酸、车叶草苷和车叶草苷酸中的一种或几种；研究表明，水晶兰苷、去乙酰基车叶草苷酸、车叶草苷和车叶草苷酸中的一种或几种能够很好的激活维生素D受体，通过激活维生素D受体，从而对乳腺癌、胰腺癌、结肠癌具有预防和治疗作用。体外细胞增殖抑制实验结果显示：与空白对照组比较，水晶兰苷、去乙酰基车叶草苷酸、车叶草苷和车叶草苷酸在浓度1uM时，均能显著有抑制HT29结直肠癌细胞的增殖。在体荷瘤小鼠模型上，5-氟尿嘧啶化疗药在剂量减半下(20mg/kg)，分别与水晶兰苷、去乙酰基车叶草苷酸、车叶草苷和车叶草苷酸联合给药，能够显著抑制肿瘤的增殖，效果与单纯化疗组(5-氟尿嘧啶剂量40mg/kg)相当。提示水晶兰苷、去乙酰基车叶草苷酸、车叶草苷和车叶草苷酸与化疗药合用后能减少化疗药的用量、抑制结直肠癌HT29细胞增殖的作用。

2）制备一种预防动脉粥样硬化的药物组合物；该药物组合物包含下列原料配制而成：甲基异茜草素-1-甲醚、去乙酰基车叶草苷酸、甲基丁香酚；具有可有效预防动脉粥样硬化且效果明显，质控稳定适于患者长期服用的优点。

制备^[4]

一种白花蛇舌草提取物，其中主要成分为鸡矢藤苷甲酯、去乙酰基车叶草苷酸甲酯、车叶草苷酸和车叶草苷，所述的四种主要成分总含量在60％—75％。

分离制备方法分为提取、醇 沉、膜分离、非极性大孔树脂分离和工业色谱分离等步骤，具体为：

1)提取：称取白花蛇舌草原药材，加入其重量6-10倍的水煎煮提取 2-3次，每次1-3小时，得到提取液，将提取液浓缩至相对密度为0.9-1.10 得浸膏；

2)醇沉：将浸膏中加入乙醇使乙醇体积浓度达到50-70％，室温静置 12-24小时，过滤，取滤液浓缩至相对密度1.05-1.10；再加入乙醇使乙醇体 积浓度达到75-80％，室温静置12-24小时过滤，取滤液浓缩挥发除去乙醇，样品溶液经过10000-25000转/分钟的高速离心机离心；

3)膜分离：此醇沉组分再通过3000-6000Da的膜分离，得到膜分离组分；

4)非极性大孔树脂分离：将膜分离组分上样于非极性大孔树脂柱，上样量与分离材料体积比为1：100—500，分别采用流动相体积浓度10-30％ 的乙醇和70-95％乙醇洗脱，每次洗脱的体积为3-5个柱体积，流速为1-3 个柱体积/小时；循环洗脱，洗脱液浓缩，即为白花蛇舌草大孔树脂分离组分；

5)工业色谱分离：以粒径5-20微米的OEG系列硅胶键合固定相为色谱填料，以甲醇和水为流动相，梯度洗脱，甲醇的体积浓度从2-100％变化，收集目标组分，干燥处理即为白花蛇舌草提取物。其中鸡矢藤苷甲酯的含量在 10％—15％，去乙酰基车叶草苷酸甲酯含量在10％—20％，车叶草苷酸含量在20％—25％，车叶草苷含量在20％—25％。

主要参考资料

[1] HPLC法测定白花蛇舌草注射液中去乙酰基车叶草苷酸和鸡屎藤次苷

[2] CN201810472547.X一种维生素D受体激动剂

[3] CN201610379130.X一种预防动脉粥样硬化的药物组合物及其应用

[4] CN200810010309.3 一种白花蛇舌草提取物及其分离制备方法