溴酚兰的应用

概述^[1]

溴酚蓝是一种浅黄色到棕黄色粉末；易溶于氢氧化钠溶液，溶于甲醇、乙醇和苯，微溶于水(约0.4g/100ml)，吸收波长422nm。其是一种pH指示剂，在pH3.0~4.6范围，颜色由黄变蓝；其也常用做电泳指示染料，凝胶中电泳迁移速度在小分子核酸或蛋白质区域。在研究人血红蛋白与各种动物血红蛋白相互作用(简称互作)时，偶然发现,溴酚兰(BPB)在交叉电泳过程中也能与鸡血红蛋白发生互作,但BPB与成人血红蛋白却没有此种现象。BPB与血红蛋白不同,它是一种低分子化合物,其与血红蛋白的互作,在机制上可能不同于血红蛋白之间的相互作用。

应用^[2-4]

溴酚兰应用举例如下：

1）制备一种用于氢离子识别的光化学复合敏感膜。方法的步骤如下：1)首先将55克丙烯酰胺溶于20-30毫升蒸馏水中，进行过滤，然后将过滤后的液体冷却至室温，再进行抽滤，待其结晶并自然晾干后，真空干燥，得到纯丙烯酰胺；2)把10克纯丙烯酰胺、0.04-0.05克的过硫酸铵、0.15-0.25克的N，N亚甲基丙烯酰胺、0.01-0.012克的亚甲酚紫、0.02-0.022克的溴酚兰溶于蒸馏水中，用氮气去氧并逐步加温，得到基于亚甲酚紫和溴酚兰的H+离子敏感聚合物；3)使用高速离心机旋转将上述聚合物形成光化学复合敏感膜。本发明工艺简单、成本低，制备的敏感膜响应速度、温度特性、重复性好。能有效扩大对氢离子的敏感范围，可用于制造氢离子光化学传感器的识别器的敏感部分。

2）制备一种具备补钙功能的复合蛋白粉，包括以下原料及重量分数：杏仁饼粕占总质量比为30～40％；丙酮占总质量比为1.5～2.5％；小苏打溶液占总质量比为8～15％；盐酸占总质量比为1.5～2.5％；溴酚兰占总质量比为1.5～2.5％；维生素D占总质量比为12～18％；葡萄糖酸钙占总质量比为15～20％；乙醇占总质量比为1.5～2.5％和蒸馏水占总质量比为15～20％。本发明以杏仁饼粕为原料，使用丙酮和乙醇浸提，过滤、干燥的方法制备蛋白粉，葡萄糖酸钙作为补钙剂，使用此方法制作而成的复合蛋白粉不但感官质量明显改善，而且蛋白质和葡萄糖酸钙相互配合使用能大幅度提高使用效果，适合缺钙中老年人食用。

3）制备一种预测磺脲类药物疗效的试剂盒，含有下述组分：(1)红细胞裂解液；(2)白细胞裂解液；(3)蛋白沉淀液；(4)核酸储存液；(5)PCR反应混合液(含MgCl2、dNTP、PCR扩增引物和内标)；(6)DNA聚合酶；(7)阳性质控；(8)阴性对照；(9)内切酶缓冲体系；(10)限制性内切酶；(11)PCR用水；(12)10×电泳上样缓冲液：0.25%溴酚兰，40%(w/v)蔗糖水溶液。本发明通过提取生物样品中的基因组DNA，经过聚合酶链式反应-限制性酶切片段多态性(PCR-RFLP)分析方法，检测个体生物样品中磺脲类受体基因的多态性情况，预测磺脲类药物的疗效。

制备

1.将苯酚红溶于冰乙酸，搅拌下加入溴溶于冰乙酸的溶液，搅拌几分钟后倾入60℃热水中，冷却至室温，放置过夜。过滤，依次用冰乙酸、苯洗涤滤饼，晾干，得溴酚蓝。

2.将酚红溶于冰乙酸中，加热至沸，滴加溴溶于冰乙酸中的溶液，黄色固体析出时，过滤，用乙酸洗去游离溴，置于空气中干燥后即得粗品。用冰乙酸或丙酮与冰乙酸混合溶剂重结晶，得纯品溴酚蓝。

3.将酚红和溴分别溶于醋酸中，制成溶液。先将酚红醋酸溶液加热至沸，然后在搅拌下缓慢加入溴的醋酸溶液：当酚红反应完全且黄色晶体不再析出后，冷却，过滤。用少量醋酸洗去结晶中的游离溴后，用醋酸或丙酮醋酸进行重结晶，在空气中干燥得纯品溴酚蓝。

主要参参考资料

[1] 鸡血红蛋白与溴酚兰之间的相互作用

[2] CN200510061995.3用于氢离子识别的光化学复合敏感膜的制备方法

[3] CN201810655552.4一种具备补钙功能的复合蛋白粉及其制备方法

[4] CN200610002634.6预测磺脲类药物疗效的试剂盒