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多糖

供应商 方法名称 仪器设备 应用范围 方法原理 试剂 试样制备 操作步骤

方法名称

六味地黄丸—多糖的测定—苯酚-硫酸法

仪器设备

仪器设备： 分光光度计
试样制备： 1.对照品溶液的制备
精密称取105℃ 干燥至恒重的葡萄糖75mg， 置于小烧杯中加适量蒸馏水溶解，然后定量转移至250ml 量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀备用。
2. 供试品溶液的制备
精密称取1g 六味地黄丸粉末，加80%乙醇加热回流提取(100ml×1h)2 次，过滤，残渣用80 热乙醇洗涤(10ml×2)后，再用蒸馏水洗涤(100ml×1h)2 次。残渣用热蒸馏水洗涤(10ml×2)， 合并水滤液，用蒸馏水定容至250ml ，摇匀备用。
注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

应用范围

本方法采用苯酚-硫酸法测定六味地黄丸中多糖的含量。
本方法适用于中成药制剂六味地黄丸。

方法原理

供试品加乙醇加热回流提取，提取液过滤，滤渣重复提取2 次，合并提取液，制成供试液，进行电泳。于490nm 处测定吸收度，按多糖的吸收系数计算其含量。

试剂

1. 浓硫酸
2. 95%乙醇
3. 无水葡萄糖
4. 苯酚试剂：取苯酚(cp)200g 加铝片0.2g和碳酸氢钠0.1g，蒸馏收集182℃ 馏分。
5. 新蒸苯酚配成5%(g/v)的水溶液，摇匀备用。

试样制备

1.对照品溶液的制备
精密称取105℃ 干燥至恒重的葡萄糖75mg， 置于小烧杯中加适量蒸馏水溶解，然后定量转移至250ml 量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀备用。
2. 供试品溶液的制备
精密称取1g 六味地黄丸粉末，加80%乙醇加热回流提取(100ml×1h)2 次，过滤，残渣用80 热乙醇洗涤(10ml×2)后，再用蒸馏水洗涤(100ml×1h)2 次。残渣用热蒸馏水洗涤(10ml×2)， 合并水滤液，用蒸馏水定容至250ml ，摇匀备用。
注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤

1. 标准曲线的绘制
分别精密量取葡萄糖对照品溶液1.0、 2.0 、3.0 、4.0、5.0、 6.0ml 于50ml 量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度。分别取上述溶液2.0ml 置于25ml 棕色量瓶中，分别加1.0ml 苯酚，混匀，迅速加5.0ml 浓硫酸，振摇5min， 置沸水浴中加热15min， 再置冷水中冷却30min ，另以2.0ml 蒸馏水同上平行操作为空白对照，于490nm 处测定吸收度，将上述数据作回归处理得到回归方程。
2. 供试品的测定
分别精密量取供试品溶液2.0ml ，按“标准曲线的绘制”项下“于50ml 量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度”起，同法操作测定吸收度，由标准曲线得到供试品溶液中多糖含量，进而计算六味地黄丸中多糖的含量。
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