产品名称:猪圆环病毒Ⅱ型PCR试剂盒
英文名称:详见说明书
编号: FSP2824
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、产品仅供科研制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
Human PLCγ2(Phospholipase C Gamma 2, Phosphatidylinositol Specific) ELISA KitHuman PAR3(Protease Activated Receptor 3) ELISA Kit乙酰丙酮亚铁 细胞ERK蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒
Human PKC(Protein Kinase C) ELISA KitHuman PARP4(Poly ADP Ribose Polymerase 4) ELISA Kit乙酰丙酮亚铁载玻片细胞ERK蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human PKCβ1(Protein Kinase C Beta 1) ELISA KitHuman Pax(Paxillin) ELISA Kit5-碘-2'-脱氧尿苷冰冻切片组织ERK蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human PCNA(ProlifeRating Cell Nuclear Antigen) ELISA KitHuman PCDH15(Protocadherin 15) ELISA Kit5-碘-2'-脱氧尿苷石蜡切片组织ERK蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human PDK4(Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 4) ELISA KitHuman PCDHβ16(Protocadherin Beta 16) ELISA Kit丁酸异戊酯 载玻片细胞ERK蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human PDP(Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase) ELISA KitHuman PCDHγA2(Protocadherin Gamma A2) ELISA Kit丁酸异戊酯 冰冻切片组织ERK蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human PDCD1LG1(Programmed Cell Death Protein 1 Ligand 1) ELISA KitHuman PCI(Protein C Inhibitor) ELISA Kit乙烯硫脲 石蜡切片组织ERK蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human PCPE1(Procollagen C Proteinase Enhancer 1) ELISA KitHuman PCIII(Procollagen III) ELISA Kit乙烯硫脲 细胞ERK蛋白表达比色法定量检测试剂盒
猪圆环病毒Ⅱ型PCR试剂盒双去甲氧基姜黄素Ⅲ型前胶原肽检测试剂盒5mg1197-18-8Rat Neuroglobin, NGB Elisa KitHPLC98%Ⅲ型前胶原肽检测试剂盒5mgALP100mgCAS号:透析袋 即用型 扁宽31 截留分子量500-100023670-94-296T载脂蛋白A2(APOA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Ⅲ型前胶原肽检测试剂盒5mgALP5290-62-0高端化学试剂TNF受体关联因子5(TRAF5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)25mgCAS号:透析袋 即用型 扁宽32 截留分子量8000570-72-996T载脂蛋白B(APOB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Ⅲ型前胶原氨基末端肽检测试剂盒5mgSE5290-62-0高端化学试剂Toll样受体衔接分子1(TICAM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
姜黄醇Ⅲ型前胶原氨基末端肽检测试剂盒5mg1197-18-8Rat Neuroglobin, NGB Elisa KitHPLC98%Ⅲ型前胶原氨基末端肽检测试剂盒5mgSE25mgCAS号:透析袋 即用型 扁宽32 截留分子量8000570-72-996T载脂蛋白B(APOB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Ⅲ型前胶原氨基末端肽检测试剂盒5mgSE5290-62-0高端化学试剂Toll样受体衔接分子1(TICAM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)50mgCAS号:透析袋 即用型 扁宽32 截留分子量1000019716-26-896T多巴胺受体D2(DRD2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Ⅲ型前胶原氨基端肽检测试剂盒5mgSE485-47-2高端化学试剂TANK结合激酶1(TBK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
槲皮素-3-半乳糖苷Ⅲ型前胶原氨基端肽检测试剂盒5mg83-48-7Rat Thrombopoietin, TPO Elisa KitHPLC98%Ⅲ型前胶原氨基端肽检测试剂盒5mgSE50mgCAS号:透析袋 即用型 扁宽32 截留分子量1000019716-26-896T多巴胺受体D2(DRD2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Ⅲ型前胶原氨基端肽检测试剂盒5mgSE485-47-2高端化学试剂TANK结合激酶1(TBK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)10mgCAS号:透析袋 即用型 扁宽32 截留分子量15000112244-29-896T多巴胺受体D2(DRD2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Ⅲ型前胶原C端肽检测试剂盒5mgIL-39485-47-2高端化学试剂V-Maf肌肉腱膜纤维肉瘤癌基因同源物(MAF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Ⅲ型前胶原C端肽检测试剂盒5mg83-48-7Rat Thrombopoietin, TPO Elisa KitHPLC98%Ⅲ型前胶原C端肽检测试剂盒5mgIL-3910mgCAS号:透析袋 即用型 扁宽32 截留分子量15000112244-29-896T多巴胺受体D2(DRD2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Ⅲ型前胶原C端肽检测试剂盒5mgIL-39485-47-2高端化学试剂V-Maf肌肉腱膜纤维肉瘤癌基因同源物(MAF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)50mgCAS号:透析袋 即用型 扁宽34 截留分子量250006025-53-222149-69-596T多巴胺转运蛋白(DAT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Ⅲ型前胶原检测试剂盒5mgGzms-A485-47-2高端化学试剂V-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤病癌基因同源物(KRAS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Ⅲ型前胶原检测试剂盒5mg83-48-7Rat soluble Factor-related Apoptosis, sFAS/Apo-1 Elisa KitHPLC98%Ⅲ型前胶原检测试剂盒5mgGzms-A50mgCAS号:透析袋 即用型 扁宽34 截留分子量250006025-53-222149-69-596T多巴胺转运蛋白(DAT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Ⅲ型前胶原检测试剂盒5mgGzms-A485-47-2高端化学试剂V-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤病癌基因同源物(KRAS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)20mgCAS号:透析袋 即用型 扁宽34 截留分子量500006025-53-259092-94-396T肿瘤蛋白p53(TP53)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Ⅲ型胶原蛋白检测试剂盒5mgPF;PFP90-44-8高端化学试剂白介素18结合蛋白(IL18BP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
扁桃苷Ⅲ型胶原蛋白检测试剂盒5mg7783-18-8Rat soluble Factor-related Apoptosis, sFAS/Apo-1 Elisa KitHPLC98%Ⅲ型胶原蛋白检测试剂盒5mgPF;PFP20mgCAS号:透析袋 即用型 扁宽34 截留分子量500006025-53-259092-94-396T肿瘤蛋白p53(TP53)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Ⅲ型胶原蛋白检测试剂盒5mgPF;PFP90-44-8高端化学试剂白介素18结合蛋白(IL18BP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)10mgCAS号:透析袋 即用型 扁宽38 截留分子量10006025-53-216503-32-596TToll样受体4(TLR4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Ⅲ型胶原检测试剂盒5mgCTSD90-44-8高端化学试剂早期内体抗原1(EEA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Ⅲ型胶原检测试剂盒5mg7783-18-8Rat Bcl-2 associated X protein, Bax Elisa KitHPLC98%Ⅲ型胶原检测试剂盒5mgCTSD10mgCAS号:透析袋 即用型 扁宽38 截留分子量10006025-53-216503-32-596TToll样受体4(TLR4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Ⅲ型胶原检测试剂盒5mgCTSD90-44-8高端化学试剂早期内体抗原1(EEA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)20mgCAS号:透析袋 即用型 扁宽38 截留分子量200084650-60-2548-82-396T肌球蛋白重链1(MYH1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%3氧代5α类固醇4脱氢酶2检测试剂盒5mgDV90-44-8高端化学试剂多萜醇酸-N-乙酰氨基葡萄糖酸转移酶1(DPAGT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
苦参素3氧代5α类固醇4脱氢酶2检测试剂盒5mg1821-12-1Rat Bcl-2 associated X protein, Bax Elisa KitHPLC98%3氧代5α类固醇4脱氢酶2检测试剂盒5mgDV20mgCAS号:透析袋 即用型 扁宽38 截留分子量200084650-60-2548-82-396T肌球蛋白重链1(MYH1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%3氧代5α类固醇4脱氢酶2检测试剂盒5mgDV90-44-8高端化学试剂多萜醇酸-N-乙酰氨基葡萄糖酸转移酶1(DPAGT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)20mgCAS号:透析袋 即用型 扁宽40 截留分子量500084650-60-2156-38-796T肌球蛋白重链1(MYH1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%3型1-酸鞘氨醇受体检测试剂盒5mgHBV32503-27-8高端化学试剂DNA损伤诱导转录因子3(DDIT3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
3,4-二羟基肉桂酸3型1-酸鞘氨醇受体检测试剂盒5mg1821-12-1Rat Mannma binding protein/mannan binding lectin, MBP/MBL Elisa KitHPLC98%3型1-酸鞘氨醇受体检测试剂盒5mgHBV20mgCAS号:透析袋 即用型 扁宽40 截留分子量500084650-60-2156-38-796T肌球蛋白重链1(MYH1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%3型1-酸鞘氨醇受体检测试剂盒5mgHBV32503-27-8高端化学试剂DNA损伤诱导转录因子3(DDIT3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)20mgCAS号:透析袋 即用型 扁宽45 截留分子量100084650-60-241059-80-796T肌球蛋白重链2(MYH2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%3-硝基酪氨酸检测试剂盒5mgSERPINB132503-27-8高端化学试剂H2A组蛋白家族成员V(H2AFV)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
3-硝基酪氨酸检测试剂盒5mg1821-12-1Rat Mannma binding protein/mannan binding lectin, MBP/MBL Elisa KitHPLC98%3-硝基酪氨酸检测试剂盒5mgSERPINB120mgCAS号:透析袋 即用型 扁宽45 截留分子量100084650-60-241059-80-796T肌球蛋白重链2(MYH2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%3-硝基酪氨酸检测试剂盒5mgSERPINB132503-27-8高端化学试剂H2A组蛋白家族成员V(H2AFV)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)10mgCAS号:透析袋 即用型 扁宽45 截留分子量200084650-60-2475-75-296T肿瘤坏死因子受体超家族成员8(TNFRSF8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶1检测试剂盒5mgANGPTL832503-27-8高端化学试剂B-细胞κ-轻肽基因增强子抑制因子激酶β(IκBKβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)