发布人:武汉艾美捷科技有限公司
发布日期:2025/10/17 15:37:08
在生命科学的宏伟殿堂中,脱氧核糖核酸(DNA)无疑是最为核心的基础材料。它不仅是承载遗传信息的生命蓝图,更是无数生物化学与分子生物学实验的起点和研究对象。从酶动力学研究到基因克隆,从教学示范到高端测序,不同来源、不同形态的DNA制剂扮演着不可或缺的角色。Worthington所提供的多样化DNA产品,正如同一个精密的“分子工具箱”,为科研人员探索生命奥秘提供了坚实而多样的物质基础。

一、小牛胸腺DNA:经典、纯净的酶学研究底物
小牛胸腺是实验室中特传统、特经典的DNA来源之一。Worthington制备的小牛胸腺DNA(产品代码: DNA)采用独特的纯化工艺,旨在超大限度地降低蛋白质和RNA的污染,其纯度优于市场上大多数同类产品。这种DNA是高度聚合的长链分子,使其成为研究脱氧核糖核酸酶(DNase)的理想底物。
一个关键的技术细节在于,DNA纤维素,单链(货号:WBC-LS01132)是以钠盐形式提供的。要使它能被DNase I有效作用,必须在反应体系中添加镁离子(Mg²⁺),因为镁离子是DNase I激活所必需的辅因子。这一特性使得研究人员可以精确控制酶解反应的起始和进程,非常适合用于酶动力学分析、酶活力单位的测定以及酶抑制剂的筛选。
此外,小牛胸腺DNA还被巧妙地固定化在纤维素上,制成了双链DNA纤维素(DNACELDS) 和单链DNA纤维素(DNACELSS)。这些产品是亲和层析技术中的关键材料,常用于从复杂混合物中特异性纯化或吸附DNA结合蛋白,如转录因子、DNA聚合酶等,是研究蛋白质与核酸相互作用的强大工具。
二、鲑鱼睾丸DNA:稳定的“非哺乳动物”参考
源自鲑鱼睾丸的DNA(产品代码: SDNA)是另一个重要的DNA来源。它通过改良的Emanuel和Chaikoff方法制备,确保了至少75%的核酸处于天然的双链构象。与哺乳动物来源的DNA相比,鲑鱼DNA在某些应用中具有其独特优势。例如,由于其GC碱基含量与哺乳动物DNA存在差异,它在某些杂交实验中可以作为有效的竞争DNA,用于封闭非特异性结合位点,从而降低背景信号。
为了满足更广泛的研究需求,还提供了变性并片段化的鲑鱼睾丸DNA(SDNAD)。该产品经过机械剪切和热变性处理,形成了短链、单链的DNA片段。这种形态的DNA在制备杂交探针、研究单链核酸酶活性或作为随机引物等方面尤为有用。
三、大肠杆菌与Lambda噬菌体DNA:分子克隆的标准化材料
随着分子生物学的发展,对DNA的纯度和均一性提出了更高要求。源自大肠杆菌(DNAEC) 的DNA,采用经典的Marmur方法制备,是细菌遗传学研究的标准材料。
而Lambda噬菌体DNA(DNAL) 则代表了更高标准的纯度与均一性。它从氯化铯密度梯度离心纯化的噬菌体中提取,其A260/A280吸光度比值≥1.8,这是判断核酸样品蛋白质污染程度的重要指标,数值表明蛋白质杂质含量极低。在琼脂糖凝胶电泳中,它呈现为单一、清晰的条带,证明了其分子的均一性。该产品溶解于pH 8.0的10 mM Tris-HCl缓冲液(含1 mM EDTA)中,这种缓冲体系能有效稳定DNA,防止降解。它常被用作DNA分子量标准、转染实验的对照品,以及体外包装和连接反应的底物。
更进一步,Worthington还提供了通过限制性内切酶消化Lambda DNA产生的特定DNA片段(如DNALBSTE, DNALECOR, DNALHIND)。这些片段具有明确的已知长度,是校准电泳分子量标准、优化PCR条件以及构建基因图谱的“黄金标准”。
四、技术要点与相关产品生态
在实验操作中,准确的定量是成功的前提。技术说明中指出:一个A260吸光度单位相当于50微克DNA。这一换算关系是实验室对DNA进行快速、准确定量的基础。
在储存方面,不同的DNA产品有其特定要求。例如,Lambda噬菌体DNA(DNAL)必须在-20°C下冷冻保存,一旦融化后,建议短期存放在2-8°C,并应避免反复冻融以防止DNA链的断裂和降解。
围绕DNA研究,一个庞大的“工具酶”生态系统至关重要。产品列表中提及的相关产品,如:
*核酸酶:脱氧核糖核酸酶I和II(DP/D/DCLS, HDA/HDAC)、微球菌核酸酶(NFCP)、S1核酸酶(SINUC),用于特异性降解DNA。
*修饰酶:碱性磷酸酶(CAP/BAPF等)用于去除DNA末端的磷酸基团;磷酸二酯酶I和II(VPH, SPH)用于核酸的外切消化。
*蛋白酶:蛋白酶K(PROK/PROKS)用于在DNA提取中消化去除蛋白质。
*逆转录酶:重组HIV逆转录酶(RTHIV)用于以RNA为模板合成DNA。
*RNA酶:核糖核酸酶A(R/RAF等)和T1(RT1S)用于在DNA制备过程中去除RNA污染。
*保护剂:无核酸酶白蛋白(BSANF)用于稳定酶反应。
这些工具与各种DNA产品共同构成了一个完整的工作流程,支撑着从核酸提取、纯化、修饰到分析的全过程。
文献参考:
Aktipis, S.
DNA - The Replicative Process and Repair , Textbook Biochem. with Clin. Correlations, 3rd ed , 767 , 1992
Albertini, J. and Garnier-Suillerot, A.
Iron-Bleomycin-Deoxyribonucleic Acid System. Evidence of Deoxyribonucleic Acid Interaction with the alpha-Amino Group of the beta-Aminoalanine Moiety , Biochemistry 23 , 47 , 1984
Alberts, B.
Prokaryotic DNA Replication Mechanisms , Phil Trans R Soc Lond 317 , 395 , 1987
https://www.amyjet.com/products/WBC-LS01132.shtml
相关新闻资讯