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发布人：江苏麦格生物科技有限公司
发布日期:2026/5/20 9:47:31
🔹贴壁细胞传代
1️⃣ 准备工作
超净台紫外灭菌30min，把培养基、胰酶、PBS提前放进37℃水浴锅预热✅ 离心管、移液管、枪头等耗材可以一起照！
2️⃣ 弃旧液+清洗
拿出来细胞瓶，先把里面的旧培养基倒或吸干净（千万别洒出来！），加2-3mL无菌PBS轻轻晃一晃，润洗瓶底残留的血清（血清会抑制胰酶活性！），然后倒掉PBS。
3️⃣ 胰酶消化
加1mL 0.25%胰酶，铺满瓶底就行(若感觉胰酶有点多可以倒出来一部分)，37℃孵箱放1-2min！重点来了👉 每隔30s拿出来晃一下，显微镜下看到细胞变圆、间隙变大，立刻加完全培养基终止消化！（消化过度细胞直接死亡，血的教训！）
4️⃣ 吹打混匀
用移液管轻轻吹打瓶底和瓶壁，把细胞吹成单细胞悬液（温柔点！别出气泡）。
5️⃣ 接种
按1:3或1:4的比例接种分到新的细胞瓶里，(注⚠️若刚才加了3ml完全培养基，1：3比例传代，则取出1ml细胞到新的细胞培养瓶即可。传代比例指的是把原来的细胞分成了几份，可根据传代比例决定终止消化时加入的完全培养基的量。)补足培养基，晃匀后放回培养箱，搞定～
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