上海源叶生物科技有限公司

首页 产品目录 产品目录(简版) 公司动态 企业认证 企业体检 公司相册 用户评价 联系我们

酵母总RNA提取方法

发布人:上海源叶生物科技有限公司

发布日期:2014/8/14 14:22:47

问: 请问大家提取酵母的总RNA都用什么方法?有好用的试剂盒吗?酵母总RNA提取应该注意什么? 答:使用热酚法抽提酵母RNA,很好用,至今没有失败过。 (1) 将酵母细胞培养在3ml选择性培养基中,30℃过夜旋转培养。 (2) 稀释过夜培养的菌液,重新在10ml培养基中培养细胞。 (3) OD600达到1.0时,收菌,4000rpm/min离心5min,弃培养基。 (4) 将细胞悬浮于400μl AE缓冲液(50mM Sodium Acetate,10mM EDTA 调整pH值至5.2)。 (5) 加入1/10体积的10% SDS,充分混合。 (6) 加入等体积在65℃预热的酸性酚(pH4.5),混合。 (7) 65℃加热5min,冰上放置10min。 (8) 在室温下8000rpm/min离心10min。 (9) 取水相,加入等体积的酚/氯仿/异戊醇(25∶24∶1),10000rpm/min离心8min。 (10) 取水相,加入等体积氯仿/异戊醇(49∶1)10000rpm/min离心8min。 (11) 加入1/10体积3M pH5.2的醋酸钠,2.5倍体积的纯乙醇,-20℃过夜沉淀。 (12) 沉淀样品于4℃离心5min,去除液体。 (13) 在冰上干燥RNA(放置15min),最后用适量DEPC水溶解RNA。

相关新闻资讯

源叶三月展会排期新鲜出炉,诚邀您来参观

2024/03/13

三月,南风吹拂,燕子归来 百花萌发,江水初暖,在这春意盎然的季节,各大展会相继临近。 源叶生物,诚邀各位莅临现场参观,期待您的到来! 3月展会安排 3月16日-3月18日重庆国际博览中心 第二十一届中国国际检验医学暨输血仪器试剂博览会 3月21日-3月23日南京国际展览中心 2024第二十届中国南京科学仪器及实验室装备展览会 一、第二十一届中国国际

疯狂双十一,带你嗨不停!

2023/11/01

展会报道|第二十届北京分析测试学术报告会暨展览会

2023/09/19

这是一个充满激情与活力的现场,第二十届北京分析测试学术报告会暨展览会(BCEIA)于2023年9月6日盛大开幕,来自行业的专家学者、企业代表和观众们齐聚一堂,共同探讨前沿科技与创新应用,展示最新的测试分析技术与设备。 【源叶】展会现场精彩回顾 W1004展位,是我们源叶团队的展示区域。这里摆放着我们最新科研产品