小鼠黑色素瘤细胞
小鼠黑色素瘤细胞 用途与合成方法
小鼠黑色素瘤细胞B16-F10是来源于C57BL/6J小鼠自发性肿瘤细胞,在显微镜下呈成纤维细胞样。这种细胞的增殖能力很强,仅需接种少量细胞,便可在数天后形成克隆。另外它还具有侵袭性强、成瘤率高等特点,被认为是构建肿瘤模型理想的细胞,几乎所有科研人员建立肿瘤模型时会考虑使用B16-F10细胞。
细胞在本库通过支原体检测(可供检测报告)。
细菌检测结果:阴性;真菌检测结果:阴性
细胞在本库通过STR种属污染鉴定:该株细胞为小鼠细胞,没有人源及其他物种细胞污染。
STR鉴定结果如下:
1-1 17 18
1-2 19 20
2-1 16 16
3-2 14 15
4-2 20.3 21.3
5-5 16 20
6-4 18 19
6-7 15 16
7-1 26.2 26.2
8-1 16 17
11-2 16 17
12-1 17 18
13-1 17.1 18.1
15-3 22.3 23.3 24.3
17-2 15 16 17
18-3 15 16
19-2 13 13
X-1 28 28 B16细胞是一株小鼠黑素瘤细胞。 黑色素瘤细胞
1)准备RPMI-1640培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。
2)小鼠黑色素瘤细胞培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3)小鼠黑色素瘤细胞冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
1,细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入1ml含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2,4min 1000rpm离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度不低于1x10E6/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。
3,将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
小鼠 品系C57BL/6J 未知 皮肤,黑素瘤 小鼠黑色素瘤细胞是一种常用的细胞系,用于研究黑色素瘤的发生、发展和治疗。B16-F10是其中一种小鼠黑色素瘤细胞系,来源于C57BL/6J小鼠的皮肤。 贴壁生长(Adherent) 未知 成纤维细胞样,贴壁生长 肿瘤细胞 黑色素瘤(Melanoma)1. 不建议使用高糖DMEM培养
有文献说明用高糖DMEM培养小鼠黑色素瘤细胞(B16)会促进黑色素分泌,因此常规扩增培养不建议使用高糖DMEM。需注意,并不是所有品牌的高糖DMEM都可以使该细胞分泌黑色素,以实际情况为准。
2. 注意控制细胞密度
密度过高和过低都会影响细胞状态。密度过低时,细胞生长速度减慢;长满后长时间高密度培养可能导致细胞黑色素分泌或细胞状态变差。建议细胞生长至80%密度时立即传代。
3. 细胞生长较快
注意每天观察细胞密度和培养基颜色,及时换液或传代。应注意每天传代对细胞不利,通过控制接种密度将传代频率保持在2天左右传一次为宜。
4. 培养时背景中可能有黑点
背景中存在少量黑点,为细胞代谢产物和细胞碎片,不影响细胞生长。若碎片较多可以通过PBS润洗或换液清除。