人Y一谷氨酞转肤酶(Γ-GTP)ELISA试剂盒

人Y一谷氨酞转肤酶(Γ-GTP)ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人Y一谷氨酞转肤酶(Γ-GTP)水平。 用纯化的人Y一谷氨酞转肤酶(Γ-GTP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入Y一谷氨酞转肤酶(Γ-GTP),再与HRP标记的Γ-GTP抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。 TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的Y一谷氨酞转肤酶(Γ-GTP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人Y一谷氨酞转肤酶(Γ-GTP)浓度。

1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。

4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。