U266 [U266B1] (人多发性骨髓瘤细胞) (STR鉴定正确)

U266B1 [U266] （人多发性骨髓瘤细胞）是从一名 53 岁男性骨髓瘤患者的外周血中分离的 B 淋巴细胞。细胞对 EBV 呈阴性，具有高度特征。该细胞表达浆细胞相关抗原（PCA-1、CD38、CD56、CD44、syndecan-1）和 BCMA，但不表达 B 淋巴细胞抗原 CD19 或 CD20。这些细胞分泌 IgE1，可用作人杂交瘤中的融合伴侣，用于生产人单克隆抗体。U266B1 细胞表达 IL-6，不依赖外源性 IL-6 生长。U266B1 细胞在免疫功能低下的小鼠体内具有致瘤性。当通过尾静脉植入时，细胞选择性地在骨髓隔室内生长。

人

外周血 通常情况下哺乳动物外周血中是没有分裂细胞的，只有在异常情况下才能发现。外周血中的小淋巴细胞几乎都处于G1期或G0期的非增殖状态。体外培养时经一定剂量的植物血凝素（PHA）刺激，T淋巴细胞可转变为淋巴母细胞，重新进入增殖周期，进行有丝分裂。外周血中的淋巴细胞经过68-72小时（三个周期）的短期培养，即可产生大量的增殖期细胞群。 悬浮生长 淋巴母细胞样 骨髓瘤细胞

1)抽取人的外周血于肝素抗凝管中，取足5mL新鲜血液，加入PBS按1：1稀释血液（一般采血管2mL+2mL）。

2)取淋巴细胞分离液5mL于15mL灭菌离心管中待用。

3)吸取稀释血液，在离分层液上方1cm处，沿试管壁徐徐加入，使稀释血液重叠于分层液上，并与分离液形成明显界面。

4)室温，离心2000rpm，20min。此时离心管中形成5层：最上面是血浆，血浆层和淋巴细胞分离液之间是淋巴细胞层呈白膜状。

5)小心吸取中间呈白膜状的单个核细胞层，尽量全部吸出单个核细胞。加5倍以上体积的PBS洗2次，每次离心1500rpm，10min。

6)去上清液，加入1640培养基1mL混匀，取少量进行细胞计数。

7)用台盼蓝染液检查所分离的细胞活性：取2滴细胞悬液加1滴2%台盼蓝染液，5-10min后取样作湿片高倍镜检。活细胞不着色，死细胞染成蓝色。计数200个细胞，计算活细胞百分率，活性应在95％以上。

完全培养基： RPMI-1640 培养基 + 10%FBS + 1%P/S
气相：95% 空气 + 5% CO2
温度：37℃

U266B1 [U266] （人多发性骨髓瘤细胞）可用于免疫系统疾病研究和免疫学研究。这些细胞也可以作为皮下异种移植物植入。 53Y;Male 肿瘤细胞

U266 [U266B1] (人多发性骨髓瘤细胞)STR鉴定位点及结果如下：