GSK-2256098

GSK2256098 是一种有效的、选择性的、可逆的、ATP竞争性的 FAK kinase 抑制剂，apparent Ki为0.4 nM。GSK2256098 可抑制癌细胞生长并诱导凋亡。

Target	Value
FAK	0.4 nM(Ki)

GSK2256098通过结合FAK的磷酸化位点tyrosine (Y) 397，抑制FAK活性。癌细胞系OVCAR8 (ovary), U87MG (brain), and A549 (lung)与GSK2256098孵育30分钟后，GSK2256098抑制其FAK活性或Y397磷酸化，IC50分别为15, 8.5和12 nM。除此之外，GSK2256098在胞内对FAK的抑制作用最早出现于处理后30分钟，在移植瘤小鼠中可持续12小时。GSK2256098对FAK活性的抑制作用可引起Akt和ERK活性的降低。而PI3K/Akt和ERK信号是有助于细胞生存的，所以GSK2256098在某些特定的PDAC细胞中，可减弱一些异常的生存信号通路，具有药用价值。GSK2256098可通过caspase-9/PARP相关的通路促进L3.6P1的凋亡，以FAK特异方式减弱PDAC细胞的异常生长和异常的迁移能力。GSK2256098还能抑制一些GBM细胞系的生长、迁移、侵袭并诱导其凋亡。

在小鼠和大鼠中的药代动力学检测表明，GSK2256098进入到中枢神经系统中的渗透性差，不能有效通过血脑屏障。然后，它能够在恶性胶质瘤患者的肿瘤中达到一定的浓度，加快与临床前试验相关的活性作用。GSK2256098具有尚可接受的安全性，在最大耐受浓度或低于此浓度的情况下，有效作用于靶点，在间皮瘤、尤其是具有merlin loss的患者中具有临床活性。在Ishikawa orthoptopic 小鼠模型中，GSK2256098的处理组比接种了Hec1A细胞的小鼠组肿瘤重量减少、肿瘤转移减少。处理组肿瘤中微血管（CD31）的密度较低、细胞增殖少（Ki67）、凋亡率升高（TUNEL）。GSK2256098可能对具有PTEN突变的子宫癌患者具有疗效，PTEN是潜在的预测生物标记。

实施例4: 1a 2-((5-氯-2-((1-异丙基-3-甲基-1H-吡唑-5-基)氨基)吡啶-4-基)氨基)-N-甲氧基苯甲酰胺的合成 向微波反应管中依次加入2-[(2,5-二氯-4-吡啶基)氨基]-N-甲氧基苯甲酰胺(70 mg, 0.224 mmol)、1-异丙基-3-甲基-5-氨基吡唑(70 mg, 0.503 mmol)和碳酸铯(230 mg, 0.706 mmol)。将反应混合物用氮气脱气10分钟。随后加入BINAP(50 mg, 0.080 mmol)和乙酸钯(II)(10 mg, 0.045 mmol)。将反应混合物置于微波反应器中，在160℃下加热40分钟。反应完成后，粗产物通过反相高效液相色谱(Gilson)纯化，使用含0.1%甲酸的乙腈/水作为洗脱剂，得到目标化合物2-((5-氯-2-((1-异丙基-3-甲基-1H-吡唑-5-基)氨基)吡啶-4-基)氨基)-N-甲氧基苯甲酰胺(15 mg, 产率15%)。质谱(MS): M(C20H23ClN6O2)=414.89, (M+H)+=415,416; 1H NMR(400 MHz, 氯仿-d) δ ppm 9.42(br.s, 1H), 8.71(br.s, 1H), 8.02(s, 1H), 7.54(br.s., 1H), 7.06(t, J=7.5 Hz, 1H), 6.48(s, 1H), 6.32(br.s., 1H), 5.86(s, 1H), 4.47(dt, J=13.4,6.7 Hz, 1H), 3.92(s, 3H), 2.26(s, 3H), 1.41-1.43(d, J=6.6Hz, 6H)。

参考文献：

[1] Patent: US2010/113475, 2010, A1. Location in patent: Page/Page column 23-24

[2] Patent: WO2013/3575, 2013, A1. Location in patent: Page/Page column 53