HBE135-E6E7

HBE135-E6E7细胞分离于一位接受肺叶切除术的鳞状细胞癌男性患者的正常支气管上皮，并用含有人乳头瘤病毒(HPV) E6E7基因的重组逆转录病毒LXSN16E6E7感染细胞并通过0.4 mg/mL G418筛选构建而成。

HBE135-E6E7细胞系是一种人支气管上皮细胞系，源自一位54岁男性的正常支气管上皮细胞，该男性因鳞状细胞癌接受了肺叶切除手术。

永生化机制：通过携带人乳头瘤病毒（HPV）E6和E7基因的重组逆转录病毒（LXSN16E6E7）感染原代细胞，实现细胞的永生化。

基因表达：表达高水平的表皮生长因子受体（EGFR）、转化生长因子α（TGF-α）和双调蛋白（AR）mRNA，但不表达表皮生长因子（EGF）。

上皮细胞样，呈贴壁生长 在体外可持续增殖，适合长期培养 1.尽量吸干净T25瓶原培养基；2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；4.将培养瓶放入37度培养箱消化；5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）

• 当细胞汇合度达到80%-90%时，即可传代。

• 吸去培养液，加入不含钙镁的PBS轻轻润洗瓶底1-2次，吸弃PBS。

• 加入0.25%胰酶-EDTA消化液，铺匀瓶底放入培养箱中消化1-2分钟。

• 消化后，加入预温的培养基终止消化，轻柔吹打使细胞脱离基质。

• 按1:2至1:4的比例将细胞悬液均匀分配到新的培养器皿中，放入培养箱中培养。

人源（Homo sapiens） 肺/支气管（Lung/bronchus） 54岁（54 years） 转化细胞系 癌症（Carcinoma）