TEV蛋白酶

TEV蛋白酶具有很强的位点特异性，严格识别七肽序列EXXYXQ↓（G/S），切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸/丝氨酸之间。普遍应用的七肽序列为：Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。

TEV蛋白酶可把His、MBP或GST等标签设计在融合蛋白的N端，并在标签与目的蛋白之间设计加入上述七肽序列，在His、MBP或GST标签被酶切后，在目的蛋白的N端仅有一个额外的Gly/Ser氨基酸残基，从而最大限度地减少了对目的蛋白结构和功能的影响。

TEV蛋白酶的最佳酶切温度是30ºC，但在实际操作过程中，为尽量保留目的蛋白的结构和生物活性，可以在4ºC用TEV蛋白酶酶切过夜。TEV蛋白酶在pH 6.0-9.0范围内具有活性，而当pH小于或等于5时，会失去酶活性。