小鼠脑微血管内皮细胞株

通过用表达多瘤病毒中间T抗原的NTKmT逆转录病毒载体感染转化细胞 小鼠脑微血管内皮细胞株bend.3 细胞用表达多瘤病毒中T抗原的NTKmT逆转录病毒转染进行转化。观察到血管性血友病因子的表达及对荧光标记的低密度脂蛋白（LDL）的摄入确认其内皮细胞特性。bEnd.3 cells细胞可用细胞因子和脂多糖(LPS)诱导淋巴细胞的Peyer's结高内皮细胞受体， 粘膜血管定居因子(MAdCAM-1) 及内皮细胞选择素的表达。

小鼠（Mus musculus） 脑（Brain）

小鼠脑微血管内皮细胞株Bend.3细胞本身生长较慢，在低密度时会呈现不规则细胞形态，高密度时则呈规则纤维状，所以若在培养过程中发现细胞形态异常，则有可能是细胞密度低，建议细胞铺满密度较高时传代。

贴壁生长（Adherent） 将DMEM培养基（含NaHCO3 1.5g/L）中加入10%FBS、1%青霉素-链霉素溶液,将混合液过滤灭菌后即可使用。 将bEnd.3细胞（小鼠脑微血管内皮细胞株）解冻后，将细胞转移到含有10%FBS的培养基中，放入37℃的恒温培养箱中培养。细胞密度需要视具体实验而定，一般在细胞密度达到70%～90%时进行下一步操作。 6周（6 weeks） 内皮瘤（Endothelioma）

在对小鼠脑微血管内皮细胞株bend.3进行培养时，需要注意：

(1) 细胞培养过程中形态多样，低密度时容易出现放射状细胞，看似已经铺满瓶底，其实细胞量较少，需要细胞胞体排列紧密的时候进行传代；(2) 细胞培养过程中避免频繁换液，可以每隔2-3天换液或者半量换液一次；(3) 培养过程中会产生10%左右活的单颗漂浮细胞，贴壁细胞密度偏低时，注意收集悬浮细胞，贴壁细胞密度偏高时，可以换液时丢弃；(4) 接种量对细胞生长有影响，接种量过低细胞会有增殖缓慢，漂浮过多的现象，请注意控制传代比例；(5) 细胞对温度和pH较敏感，传代或换液前培养基可以常温复温4小时以上；避免使用pH改变（偏酸：颜色偏黄；偏碱：颜色偏紫红）的培养基；(6) 细胞传代过程中若出现单次消化时间过长，可进行分次消化，切不可将细胞强行吹下来，以避免吹打造成细胞机械损伤。