N-[3-(4-甲基-1-哌嗪基)苯基]-8-[4-(甲磺酰基)苯基]-[1,2,4]三唑并[1,5-A]吡啶-2-胺

CEP-33779是一个新颖的，选择性，有口服活性的JAK2抑制剂，IC50为1.8 nM，比作用于JAK1和TYK2选择性高40多倍和800多倍。 在HEL92 细胞中，CEP33779(<3 μM)浓度依赖性抑制下游靶点信号转换器的磷酸化和JAK2的5(pSTAT5)转录激活。 来自HEL92异种移植小鼠体内的HEL9肿瘤提取物中，CEP33779以55 mg/kg的剂量口服给药抑制STAT5磷酸化。在胶原-抗体诱导性关节炎(CAIA)或胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠体内，CEP33779以55 mg/kg的剂量，每天两次口服给药减少平均足肿胀和临床症状。CEP33779以55 mg/kg的剂量每天两次口服给药完全抑制CAIA 或CIA小鼠爪子磷酸-STAT3表达，与细胞因子，包括IL-12，IFNγ，IL-2，IL-1β，TNFα和GM-CSF的减少相关。CAIA 或CIA小鼠体内，CEP33779剂量依赖性减少骨退化，组织破坏和骨关节炎。在MRL/lpr全身性红斑狼疮小鼠体内，CEP33779以100 mg/kg口服给药延长生存期，并减少脾肿大/淋巴肿大，从而保护小鼠避免发展为肾小球性肾炎。在MRL/lpr全身性红斑狼疮小鼠体内，CEP33779以100 mg/kg口服给药减少几个SLE相关的促炎性细胞因子，并降低与破骨细胞活性增加相关的骨吸收生物标志物的水平。在结肠炎诱导的结直肠炎小鼠模型中，CEP33779以55 mg/kg的剂量每天两次口服给药，诱导已建立的结直肠肿瘤退化，减少血管生成，并减少肿瘤细胞的增殖。肿瘤退化与STAT3和NF-κB (RelA/p65)活化的抑制，促炎性细胞因子表达的减少，以及促进肿瘤的细胞因子白介素(IL)-6和IL-1β 的减少相关。

一般步骤：向烘箱干燥的反应管中加入乙酸钯（10 mg）、2,2'-双(二环己基膦基)联苯（30 mg）、8-[4-(甲磺酰基)苯基]-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-胺（75 mg）、1-(3-溴苯基)-4-甲基哌嗪（80 mg）、碳酸铯（270 mg）和1,4-二恶烷（5 mL）。将反应管抽真空并用氮气反冲三次，然后密封。将反应混合物在80℃下加热72小时。反应完成后，将混合物冷却至室温。用二氯甲烷（10 mL）稀释冷却的混合物，通过硅藻土塞过滤，并用二氯甲烷冲洗。滤液经蒸发浓缩后，通过柱色谱法纯化（使用ISCO自动纯化系统，胺改性的硅胶柱，洗脱剂为5%至100%乙酸乙酯的己烷溶液）。得到目标化合物N-[3-(4-甲基-1-哌嗪基)苯基]-8-[4-(甲磺酰基)苯基]-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-胺（化合物A），为黄色固体（70 mg）。熔点：232-234℃。1H NMR (400 MHz, CDCl3, δ, ppm): 8.49 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 8.25 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 8.08 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 7.65 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.27-7.20 (m, 1H), 7.04-6.95 (m, 2H), 6.84 (s, 1H), 6.60 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.30-3.25 (m, 4H), 3.10 (s, 3H), 2.63-2.58 (m, 4H), 2.38 (s, 3H)。质谱：MS = 463 (MH)+。

参考文献：

[1] Journal of Medicinal Chemistry, 2012, vol. 55, # 11, p. 5243 - 5254

[2] Organic Process Research and Development, 2016, vol. 20, # 12, p. 2085 - 2091

[3] Patent: EP2648728, 2016, B1. Location in patent: Paragraph 0047