SK-OV-3人卵巢癌细胞

SK-OV-3人卵巢癌细胞是从一位64岁白人女性卵巢腺癌患者的腹腔积液分离得到。该细胞对肿瘤坏死因子和几种细胞毒性药物（包括白喉毒素、顺铂和阿霉素）耐受。在裸鼠中成瘤，且形成与卵巢原位癌一致的中度分化的腺癌。 SK-OV-3细胞是由G·Trempe和L·J·Old于1973年从患有卵巢腺癌的64岁白人女性卵巢中分离出来。SK-OV-3细胞对肿瘤坏死因子和几种细胞毒性药物包括白喉毒素、顺铂和阿霉素均耐受。SK-OV-3细胞在裸鼠中致瘤，且形成与卵巢原位癌一致的中度分化的腺癌。SK-OV-3细胞可以用于3D细胞培养，也是一种合适的转染宿主。 1） 来源：卵巢腺癌，腹水转移
2） 形态：上皮细胞样 贴壁生长

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培养基终止消化。

用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。

上皮细胞样(边形或梭形) 1.尽量吸干净T25瓶原培养基；2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；4.将培养瓶放入37度培养箱消化；5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） 卵巢浆液性囊腺癌；腹水转移；女性；64岁 贴壁细胞