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RNA PULLDOWN试剂盒

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RNA PULLDOWN试剂盒
RNA PULLDOWN试剂盒 用途与合成方法
  • 简介蛋白质与RNA的相互作用是许多细胞功能的核心,如蛋白质合成、mRNA组装、病毒复制、细胞发育调控等,了解它们之间相互作用的分子机制对理解这些生物学过程非常重要。RNA pulldown技术利用脱硫生物素末端标记的RNA和链霉亲和素标记的磁珠高效富集及鉴定RNA结合蛋白质(RBPs)。 
  • 背景RNA pulldown技术利用脱末端标记的RNA高效富集及鉴定RNA结合蛋白(RBPs)。此方法避免了抗体的使用,大大延伸了使用范围。随着RNA pulldown技术的不断完善,其在生命科学研究及医学领域中扮演的角色愈加重要。RNA pull-down实验就是先将RNA进行标记(如生物素探针标记),再与细胞裂解液共同孵育,从而形成RNA-蛋白质复合物,之后再分离复合物得到蛋白质,通过western blot 或mass Spectrometry检测蛋白质的技术。
  • 技术原理体外转录合成生物素标记的目标lncRNA(包括环状RNA)(包含用作正负对照的RNA片段), 与细胞抽提物孵育;用亲和素锚定磁珠收集RNA-蛋白质或RNA-RNA复合物,充分洗涤后洗脱复合 物。若检测与lncRNA(包括环状RNA)相互作用的蛋白质靶分子,则对RNA-pull down产物进行 蛋白质电泳分离,银染检测目标蛋白,并切胶进行质谱分析;也可对pull-down产物直接进行 western blot验证;若检测与lncRNA(包括环状RNA)相互作用的RNA靶分子,则对RNA-pull down产物进行RNA抽提,并进行特异性的qRT-PCR检测。
  • 使用方法针对目标区域设计脱硫生物素标记的特异性RNA探针,并与细胞蛋白提取物孵育。通过偶联磁珠,经洗脱,得到目的RNA探针-蛋白质复合物。最后采用Western Blot或质谱鉴定蛋白质类型。
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  • 公司名称:广州伯信生物科技有限公司
  • 联系电话:(020)28069086
  • 产品介绍: 中文名称:RNA PULLDOWN试剂盒
    英文名称:RNA pulldown Kit
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