刚果红染液(淀粉样变性染色液)

刚果红染色是辅助病理诊断工作中的一项重要技术，尤其是在鉴别淀粉样变及其分型中发挥着 其他染色所无法比拟的作用。淀粉样物质对刚果红有选择性亲和力，刚果红是双偶氮染料，它以染料分子上的氨基与 淀粉样蛋白组织内多糖分子上的羟基结合，而附着于淀粉样蛋白纤维上而显色。

1、组织固定于10%的中福尔马林中，常规脱水及包埋。
2、切成8um的薄片，用防脱片捞起，置于烤片机上20min。
3、常规脱蜡至水。
4、刚果红染液15min,流水冲洗。
5、碳酸锂溶液分化15s，流水冲洗。
6、苏木素染液2min,流水冲洗。
7、1%盐酸酒精中分化数秒，至组织颜色变黑为宜，流水冲洗。
8、氨水中返蓝数秒，至组织颜色恢复为红色，流水冲洗。
9、常规脱水透明，树胶封片。 淀粉样蛋白呈红色，胞核呈蓝色，在偏光显微镜下淀粉样蛋白呈黄绿色的双折光。

1.多种特染同时进行时，滴加了刚果红试剂的玻片避免与雪夫试剂或滴加了雪夫试剂的玻片靠 置过近，以免刚果红与雪夫试剂发生反应。
2.严格掌握碳酸锂溶液的分化时间，分化时间过短，淀粉样物质沉积颜色过深，也可能造成 部分胶原纤维染成红色，分化时间过长，可导致淀粉样物质褪色。必要时可在显微镜下控制分化程 度。
3.配置刚果红染液后，需将配好的染液静置1一2天，过滤后即可使用。如果配好的染液立即使 用，会导致染色效果不佳，且镜下观察在切片上容易出现刚果红的沉淀物，造成污染。
4.在工作中，我们还加染高锰酸钾化一刚果红染色，用来区分AA、Aβ M淀粉样变和AL、ATTR淀 粉样变。注: 0.25%高锰酸钾氧化1min, 蒸馏水冲洗，1%草酸漂白1min; 蒸馏水冲洗;刚果红染 色。