反向染色质免疫共沉淀试剂盒 用途与合成方法
蛋白质-DNA相互作用在细胞功能方面起到了非常重要作用,比如信号传导、基因转录和染色质降解,DNA复制和重组,表观沉默等。 辨别DNA结合蛋白的靶标以及了解蛋白质-DNA相互作用对于研究细胞各项过程有着重要的作用。 染色质免疫共沉淀(ChIP)提供了一个研究蛋白质-DNA相互作用的强有力的工具。 它可以通过PCR (ChIP-PCR), 芯片(ChIP-chip), 或者高通量测序 (ChIP-seq)检测活细胞内结合在特定序列上的蛋白。 反向染色质免疫共沉淀(Reverse-ChIP),是一种游离染色质片段蛋白质组学技术(Proteomic Sofisolated Chromatinsegments,PICh),利用DNA探针和质谱(Mass Spectrometric)体内研究染色质结合蛋白。 反向染色质免疫共沉淀技术(reverse-Chromatin immunoprecipitation assay,reverse-ChIP)相对于染色质免疫共沉淀技术(ChIP),是一种在体内状态下分析DNA-蛋白质相互作用的新方法。它用特异的核酸探针捕获靶DNA片段及与其相结合的蛋白质,并用质谱仪或Western Blot检测,以确定靶DNA位点全部结合蛋白质。将细胞内的蛋白质和 DNA 交联,超声波将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后用用特异的核酸探针捕获靶 DNA 片段及与其相结合的蛋白质,蛋白质用质谱仪或 Western Blot检测,以确定靶 DNA 位点全部相关蛋白质。 Reverse-ChIP 可对靶 DNA 位点相关蛋白质进行全面、系统地鉴定,特别是寻找已知 DNA 元件相应的调节蛋白。在发现、鉴定靶 DNA 位点相关蛋白质和研究 DNA-蛋白质相互作用中有重要应用价值。 ChIP可以检测体内反式因子与DNA的动态作用,还可以用来研究组蛋白的各种共价修饰与基因表达的关系,目前已经成为表观遗传信息研究的主要方法。
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2020-01-20
反向染色质免疫共沉淀试剂盒