Taq DNA聚合酶 用途与合成方法
Taq DNA聚合酶是从一种嗜热细菌中分离提取的,该菌是1966年从美国黄石国家森林公园的一个热泉中发现的。实验表明,PCR反应时变性温度为95度,50个循环后,Taq DNA聚合酶仍有65%的活性。Taq DNA聚合酶的热稳定性是该酶用于PCR的前提条件,也是PCR技术能迅速发展和广泛应用的原因。 Taq DNA聚合酶有一个特性除了合成速度快、出错率高以外,还会使合成的产物“末端带有一个A碱基”,TA克隆即是利用Taq聚合酶此特性,Taq的PCR产物在3'末端会多出一个A,此时只须有一个与其互补的T表现在质体上,即能彼此靠近,借由接合酶连接起来。透过此方式,可省去限制酶剪切的时间,直接利用PCR产物与质体彼此有互补两端的特性,可快速黏合起来。
Taq DNA聚合酶的常用简称有Taq Pol(或Taq酶)。Taq DNA聚合酶常用于放大短DNA片段的聚合酶链式反应中(PCR)。水生栖热菌生活在温泉与深海热泉中,从其中分离的Taq酶可承受PCR中所需要的高温。因此Taq DNA聚合酶取代了原先用于PCR中的大肠杆菌DNA聚合酶。
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