奥西替尼中间体

AZ5104是AZD-9291的去甲基化代谢物,是一种有效的EGFR抑制剂.针对EGFR (L858R/T790M)\EGFR (L858R)\EGFR (L861Q)和野生型EGFR的IC50分别为小于1 nM\ 6 nM\1 nM和25 nM. 表皮生长因子受体(EGFR)是存在于细胞表面的受体酪氨酸激酶.受体活化导致二聚化和酪氨酸自磷酸化,它诱导下游细胞应答,如基因表达修饰\细胞增殖和细胞骨架重排等. 与AZD9291相比,在EGFR突变细胞系ex19del(在PC-9中为2 nmol/L)\T790M(在H1975中为2 nmol/L)以及野生型EGFR细胞(在LOVO中为33 nmol/L)系中,AZ5104具有更高的效力.在表型实验中,在各种细胞系中AZ5104表现出更大的效力. 小鼠口服给药3小时后,血浆中AZ5104的循环活性代谢物为33％.在C/L858R和C/L+T小鼠中,5 mg/kg/day剂量的AZ5104产生减小肿瘤的功效. AZ5104对ex19del (2 nM 在PC-9中)，T790M (2 nM在H1975中)，和野生型EGFR (33 nM在LOVO中)细胞系表现出良好的疗效。AZ5104引起细胞活性的抑制，对H1975 (T790M/L858R)，PC-9 (ex19del)，Calu 3 (WT)，和NCI-H2073 (WT)的IC50分别为3.3 nM，2.6 nM，80 nM，和53 nM。 在C/L858R和C/L+T小鼠中，AZ5104 (5 mg/kg/d, p.o.)诱导显著且持续的肿瘤退化。 AZ5104，是AZD-9291的脱甲基代谢物，是一种有效的EGFR抑制剂，作用于EGFR (L858R/T790M)，EGFR (L858R)，EGFR (L861Q)，和EGFR (野生型)，IC50分别为<1 nM，6 nM，1 nM，和25 nM。Phase 1。

Target	Value
EGFR (L858R/T790M)	<1 nM
EGFR (L861Q)	1 nM
EGFR (L858R)	6 nM
ErbB4	7 nM
EGFR (wildtype)	25 nM

一般步骤：将丙烯酰氯（0.584 mL，1 M在CH2Cl2中，0.58 mmol）的溶液缓慢滴加到N1-(2-二甲基氨基乙基)-N4-[4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基]-5-甲氧基-N1-甲基苯-1,2,4-三胺（中间体168，252 mg，0.58 mmol）的CH2Cl2（10 mL）溶液中，反应混合物在-5°C下搅拌1小时。随后，将反应混合物用CH2Cl2（100 mL）稀释，依次用饱和NaHCO3水溶液（25 mL）、水（25 mL）和饱和盐水（25 mL）洗涤。有机相经无水Na2SO4干燥后，减压浓缩。通过快速柱层析（FCC）纯化，使用0-30% CH3OH的CH2Cl2溶液梯度洗脱，得到目标化合物N-(5-((4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-2-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)-4-甲氧基苯基)丙烯酰胺（76 mg，27%收率），为白色固体。1H NMR (CDCl3) δ: 2.25 (6H, s), 2.27-2.34 (3H, m), 2.69 (3H, s), 2.84-2.94 (2H, m), 3.87 (3H, s), 5.68 (1H, dd), 6.40 (1H, d), 6.48 (1H, dd), 6.78 (1H, s), 7.03 (1H, d), 7.08-7.20 (2H, m), 7.33 (1H, dd), 7.65 (1H, s), 8.12 (1H, d), 8.26 (1H, d), 8.59 (1H, s), 9.74 (1H, s), 9.97 (1H, s), 10.24 (1H, s); m/z: ES+ [M+H]+ 486。

参考文献：

[1] Patent: WO2013/14448, 2013, A1. Location in patent: Page/Page column 83

[2] Patent: CN106995435, 2017, A. Location in patent: Paragraph 0359-0364

[3] Journal of Medicinal Chemistry, 2014, vol. 57, # 20, p. 8249 - 8267