人肾上腺皮质腺癌细胞 用途与合成方法
NCI-H295R [H295R] 是从一名 48 岁的黑人女性肾上腺癌患者的肾上腺中分离出来的细胞。该细胞系具有产生肾上腺雄激素的能力。它对血管紧张素 II 和钾离子有反应。
NCI-H295R细胞是源于多能肾上腺皮质癌细胞系NCI-H295细胞,后者由Gazdar·A·F等建立,从肾上腺皮质的肿瘤中分离而来。NCI-H295细胞经改变培养条件获得了NCI-295R细胞,群体倍增时间从原来的5天减为2天。NCI-295细胞悬浮生长,而NCI-H295R细胞呈单层贴壁生长。NCI-H295R细胞保留了产生雄激素的能力,对血管紧张素Ⅱ和钾离子有反应。
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肾上腺;皮层 贴壁生长 上皮细胞样完全培养基:DMEM: F-12(1:1)+ 10%FBS + 1%P/S
气相:95% 空气 + 5% CO2
温度:37℃
传代比例:1:3 ~ 1:4
传代方法:取出并丢弃培养基,用 0.25% (w/v) 胰蛋白酶-0.53 mM EDTA 溶液短暂冲洗细胞层,以去除所有含有胰蛋白酶抑制剂的血清痕迹,向培养瓶中加入 2.0 至 3.0 mL 胰蛋白酶-EDTA 溶液,并在倒置显微镜下观察细胞,直至细胞层分散(通常在 5 ~ 15 min内,注意为避免结块,在等待细胞分离时,请勿通过敲击或摇晃培养瓶来搅动细胞,难以分离的细胞可置于 37°C 以促进扩散)。加入 6.0 ~ 8.0 mL 完全生长培养基,轻轻移液吸出细胞。将细胞悬液转移至离心管中,以约 125 x g 的离心速度离心 5 ~ 10 min。弃去上清液。将细胞沉淀重悬于新鲜生长培养基中。将适当等分的细胞悬液添加到新的培养容器中。在 37°C 下孵育培养物。每周换液 2 ~ 3 次。
人肾上腺皮质腺癌细胞可以用于靶向沉默CTNNB1基因对肾上腺皮质腺癌H295R细胞增殖及醛固酮分泌影响。
NCI-H295R(人肾上腺皮质腺癌细胞)STR鉴定位点及结果图谱:

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