细菌基因组DNA快速提取试剂盒(带蛋白酶K)

细菌基因组DNA快速提取试剂盒(带蛋白酶K)用于细菌基因组DNA的小量提取。 利用细胞裂解液裂解细胞释放基因组DNA，由硅胶膜柱可逆吸附基因组DNA，经蛋白酶消化、漂洗液清洗除去蛋白质、脂质等杂质后，用纯化液洗脱获得基因组DNA。 本产品可从0.5-2 ml对数生长期的菌液（不超过106–108个）中提取到3-20μg超纯基因组DNA（OD260/280=1.7-1.9），此基因组DNA可直接用于酶切、PCR等后续实验。

1取0.5-2 ml处于对数生长期菌液，置于1.5 ml离心管中。12,000 rpm离心1min，弃上清。

2向收集到的菌体沉淀中加入200μl缓冲液DS，用漩涡振荡器剧烈振荡直至菌体彻底悬浮。

3加入20μl蛋白酶K溶液，混匀。

4加入220μl裂解液MS，漩涡振荡混匀，直至形成均一的悬浮液。65℃温浴10min。溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠。

5加入220μl无水乙醇，上下颠倒混匀。此时可能出现絮状沉淀，将溶液及絮状沉淀转移到纯化柱中。12,000 rpm离心1min，弃滤液。

6加入500μl去蛋白液PS。12,000 rpm离心1min，弃滤液。

7加入500μl漂洗液PE。12,000 rpm离心1min，弃滤液。

8加入500μl漂洗液PE。12,000 rpm离心1min，弃滤液。

9 12,000 rpm离心3min，以彻底去除纯化柱中残留的液体。

10将纯化柱置于新的1.5 ml离心管中。向纯化柱中央处，悬空加入30-100μl洗脱液TE。室温放置2min。于12,000 rpm离心2min，管底即为高纯度基因组DNA。-20℃保存。