瑞鲍迪苷

甜菊糖苷（Steviol Glycosides）提取自甜叶菊，是一种兼具高甜度与低热量的甜味剂，目前在中国、欧盟、美国、澳新、加拿大等国家/地区均已获批用于食品，被誉为世界“第三代天然0卡0热量健康糖源”。甜菊糖苷由多种糖苷单体组成，根据国家卫生健康委员会于2022年实施的《食品安全国家标准食品添加剂甜菊糖苷》（GB 1886.355-2022），我国已知糖苷包括甜菊苷、瑞鲍迪苷 A、瑞鲍迪苷B、瑞鲍迪苷C、瑞鲍迪苷D、瑞鲍迪苷E、瑞鲍迪苷F、瑞鲍迪苷M、瑞鲍迪苷N、瑞鲍迪苷O、杜克苷A、甜茶苷及甜菊双糖苷。瑞鲍迪苷D的分子式如下图所示，它的名称为(4R)-13-[[2-O-(β-D-GLUCOPYRANOSYL)-3-O-(β-D-GLUCOPYRANOSYL)-β-D-GLUCOPYRANOSYL]OXY]KAUR-16-EN-18-OICACID2-O-(β-D-GLUCOPYRANOSYL)-β-D-GLUCOPYRANOSYLESTER。化学式为C50H80O28，外观为白色固体。

雄性C57BL/6 J小鼠被喂食致肥胖的高脂肪/高糖（HFHS）饮食，并口服50mg/kg的瑞鲍迪苷（Reb）12周。在第10周和第12周，进行胰岛素和口服葡萄糖耐量试验。服用Reb的小鼠体重增加减少，内脏脂肪组织重量减少就是证明。Reb治疗小鼠的肝脏甘油三酯和胆固醇降低，脂质过氧化减少。此外，Reb降低了脂多糖结合蛋白（LBP）的水平。Reb治疗未发现影响葡萄糖稳态。每天食用甜叶菊成分对代谢健康没有不利影响。Reb治疗可以减少肥胖，缓解肝脏脂肪变性和脂质过氧化，并降低LBP，LBP是代谢性内毒素血症的标志物。 通过超高压辅助提取甜叶菊中瑞鲍迪苷工艺的寻优实验。试验结果表明,在16.8∶1mL/g液料比、429.5MPa提取压力和7.7min的保压时间下,瑞鲍迪苷A的得率达到35.2mg/g。超高压辅助提取改变了甜叶菊粉内部的微组织结构,表面的孔隙变得更大更多,组织结构变得更加疏松,从而强化了瑞鲍迪苷的润湿、溶解和扩散的传质过程。 建立以甜叶菊叶片为原料,采用超声萃取法用体积浓度70%的乙醇对瑞鲍迪苷进行提取,使用高效液相色谱仪检测甜叶菊样品液含量的方法。采用-NH2基柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈与水体积比80∶20,流速1.2 m L/min,紫外检测波长210 nm,进样量15μL。甜叶菊中瑞鲍迪苷分别在纯水、体积浓度70%乙醇、80%乙腈中提取得率为10.25 mg/g、11.52 mg/g、13.49 mg/g,范围内线性关系良好相关系数R2=0.999 9。采用体积浓度70%乙醇对瑞鲍迪苷A进行提取,此方法安全有效、操作简单、定量准确。

 将瑞鲍迪甙A(15g，15.5mmol)加入到30mL 5％的KOH水溶液中，90℃反应1小时，反应液冷却至50℃，搅拌下以6M盐酸调pH至5，过滤，沉淀用水洗，减压干燥，得Example 5RB(白 色固体)12g。收率98％。将该产品(3.48g，4.3mmol)悬浮于Ac2O(6ml，63.6mol)中，加入DMAP(5mg，0.043mmol)。再缓慢加入三乙胺(2ml，12.9mmol)，60℃搅拌反应2小时，反应液冷却至室温，加入20ml二氯甲烷搅拌溶解，有机层以水洗，减压回收得到粗品。向上述的粗品混合物中加入MeOH 10ml，缓慢滴加3ml 1％的HCl溶液水溶液，室温反应4个小时，以2N KOH调pH＝4-5，蒸去大部分甲醇，过滤，得5.0g白色固体，收率 95％。室温下将该化合物(2g，1.63mmol)溶解在20ml甲醇中，搅拌下加入K2CO 3 (105mg，25％wt，0.3eq)，滴完后室温反应两个小时，滤去固体，滤液以1N盐酸溶液缓慢调pH至6，收集混合物，过滤，固体以EtOH∶H2O＝2∶1重结晶，得白色固体瑞鲍迪苷，收率 50-70％。