橙皮素的药理作用

概述^[1-2]

橙皮素（hesperetin）是芸香科（Rutaceae）柑橘属CitrusL.植物果实中的主要活性成分，橙皮素是橙皮苷（hesperidin）的糖基配体，其结构中含有酮羰基、醚基、甲氧基以及多个酚羟基，使其具有较为广泛的药理作用。橙皮素不会在任何器官中积累，使用安全、无明显副作用。早期对橙皮素的药理作用研究主要集中在抗菌、抗炎、抗氧化、抗病毒、抗变态反应、调血脂、增强免疫及抗癌等方面。近年来，有文献报道橙皮素及其衍生物还具有抗阿尔茨海默病，抗帕金森病，抗高血糖，抗蛇毒血凝酶，抗肺、肾、肝纤维化及对一些新的肿瘤的抑制作用等。

药理作用^[1]

1. 对中枢神经系统相关疾病的作用

帕金森病（Parkinson’sdisease，PD）是由于脑内的多巴胺能神经细胞缺失造成的一种神经退行性疾病。PD最终会导致患者出现运动和认知功能障碍。评估了橙皮素对纹状体6-羟多巴胺损伤大鼠的保护作用，并且探索了其在细胞凋亡、炎症和氧化应激方面可能的作用机制。

2. 降血糖作用

糖尿病是一组代谢性疾病，已成为严重的公共卫生问题，加重了社会和经济负担。高血糖和高脂血症是糖尿病的常见特征，导致葡萄糖和脂质代谢、肝脏酶的水平均发生了改变。慢性高血糖症的特点是持续而异常的高餐后血糖水平，已成为糖尿病发病的关键因素。大鼠研究表明橙皮素能有效地保护STZ诱导的大鼠肝脏、肾脏和胰岛素中阳性细胞β-细胞的正常组织学形态。

3. 抗蛇毒血凝酶作用

毒蛇咬伤是一个全球性的、被忽视的公共卫生问题。2017年世界卫生组织报道，每年大约有550万人遭受毒蛇咬伤，约40万人死于某些类型的后遗症，如截肢，2万至12.5万人死于致命伤。运用凝胶过滤法和反向色谱法（RP-HPLC）从罗塔斯的西美斯蛇毒中分离出2种蛇毒丝氨酸蛋白酶1和2（SVSP1、SVSP2），测定其相对分子质量约为31300和24600。使用串联质谱分析（Q-TOF）对SVSP1和SVSP2进行排序，利用已知与2个目标蛋白同源的丝氨酸蛋白酶结构（PDB条目：4e7n）进行电脑模拟对接，结果表明橙皮素是这2种蛋白的靶向抑制剂。对橙皮素进行体外实验，得到了SVSPs的动力学参数，结果表明，橙皮素可能是一个非竞争性的SVSP1和SVSP2的抑制剂，可以作为研究蛇毒蛋白酶的低成本抑制剂。

4. 抗纤维化作用

心脏重塑是心脏衰竭（心力衰竭）的主要决定因素，其特征是心脏肥大、纤维化、氧化应激和肌细胞凋亡。采用胸主动脉带结扎（aorticbanding，AB）诱导的小鼠心力衰竭模型，通过对心脏质量/体质量、肺质量/体质量、心脏质量/胫骨长度、超声心电图和血液动力学参数、组织学观察以及肥厚性和纤维性标记的基因表达等数据进行评估，发现橙皮素预防了由AB引起的小鼠心脏肥大、纤维化和心脏功能障碍，并且也减弱了氧化应激和心肌细胞凋亡。进一步研究发现，橙皮素通过阻断PKCα/βII-Akt、JNK和TGF-β1-Smad信号通路抑制心脏重塑。研究发现1种新的橙皮素衍生物7[8-(N-甲基哌嗪基)橙皮素]能够通过Wnt/β-catenin途径来抑制血小板源性生长因子BB（PDGF-BB）诱发的肝星状细胞的激活和增殖。

5. 抗肿瘤作用

在人肺癌H522细胞中，橙皮素诱发了一种独立于p53途径之外的细胞信号通路，橙皮素上调了H522细胞中Fas、Fas相关死亡域蛋白（FADD）和caspase-8蛋白的表达水平，并降低了caspase-3、caspase-9、p53和Bax蛋白的表达水平。结果表明，橙皮素不仅通过p53和Bax的途径诱导了细胞凋亡，且触发了由死亡受体组成的FADD/caspase-8依赖的凋亡途径。研究橙皮素对7，12-二甲基苯丙蒽（DMBA）诱导的仓鼠颊囊鳞状细胞癌的影响，通过对脂质过氧化（LPO）副产物、酶的状态、非酶类抗氧化剂、解毒剂等因素的考察对其化学预防作用进行了评价，结果表明，橙皮素能够抑制DMBA诱导的仓鼠鳞状细胞癌。

制备^[3]

一种从枳实中提取高纯度橙皮素的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

步骤一、将枳实粉碎后用醇溶剂回流提取三次，次回流提取的醇溶剂用量为枳实质量的5～20倍，回流提取时间为1小时～2小时，第二次回流提取的醇溶剂用量为枳实质量的5～20倍，回流提取时间为1小时～2小时，第三次回流提取的醇溶剂用量为枳实质量的5～20倍，回流提取时间为1小时～2小时，滤过后合并三次滤液，将合并的滤液减压浓缩至比重为1.0～1.06的浓缩液；

步骤二、向步骤一中所述浓缩液中加入无机酸得到混合溶液，将混合溶液在温度为90℃～120℃的条件下水解3小时～10小时，自然冷却至室温后过滤，将过滤得到的滤渣用温度为80℃～100℃的软水洗涤后离心除去上清液，重复洗涤和离心1～3次，得到橙皮素粗品；所述混合溶液中无机酸的质量浓度为3％～5％；

步骤三、将步骤二中所述橙皮素粗品用质量浓度为85％以上的乙醇溶解，向溶解后的溶液中加入活性炭回流脱色1小时～2小时，然后将脱色后的溶液在温度为50℃～80℃的条件下过滤，将过滤后的滤液浓缩至滤液体积的1/4，再将浓缩后的滤液置于常温下结晶后过滤，将过滤后的固体物质干燥，得到质量纯度不小于96％的橙皮素结晶。

主要参考资料

[1] 橙皮素及其衍生物的药理作用研究进展

[2] 高纯橙皮素的制备及HPLC纯度分析

[3] CN201210017544.X一种从枳实中提取高纯度橙皮素的方法