大鼠肝实质细胞培养试剂盒的应用

背景^[1-4]

大鼠肝实质细胞培养试剂盒适合于培养大鼠肝实质细胞。试剂盒包含：1.OptiTDS TM大鼠肝实质细胞组织解离液2.大鼠肝实质细胞组织处理缓冲液3.FibrOut TM大鼠肝实质细胞成纤维抑制剂4.大鼠肝实质细胞组织洗液5.大鼠肝实质细胞生长因子及血清6.大鼠肝实质细胞基础培养基7.大鼠肝实质细胞组织预备液。

大鼠肝实质细胞分离自肝脏组织；肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官，并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用；肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里的器官，位于机体中的腹部位置，在右侧横隔膜之下，位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方，胃的上方。肝脏是机体消化系统中的消化腺，为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官，又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构：肝脏位于右上腹，隐藏在右侧膈下和肋骨深面，大部分肝为肋弓所复盖，仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁，肝上面则与膈及腹前壁相接。肝实质细胞是指具有肝功能的单位，是肝脏的基本组成单位之一。

肝实质细胞与主要病生理变化：急性肝炎、肝硬化、肝脓肿。肝实质细胞属于中高度分化细胞，生长营养需求高，在体外存活时间短；细胞呈圆形或多角形，核大而圆，居中，常染色质丰富，部分有双核或多倍体核。肝脏作为体内重要的器官，在整个物质代谢过程中具有广泛而多样的作用。

应用^[5][6]

大鼠肝实质细胞培养试剂盒可用于肝组织工程三维多孔活性支架的构建研究：

肝移植手术依然是根治末期肝衰竭的唯一手段。但是供体器官的短缺,高昂的手术费用以及术后需要长期服用免疫抑制药物这三方面原因限制了肝移植的发展。以细胞治疗为基础的肝脏治疗方案――肝组织工程,以替代肝移植手术为目标展开研究,希望在未来可以构建人工肝组织,替代部分肝功能。随着肝组织工程的发展,人们对细胞培养支架的要求不再局限于生物相容性,而是要求支架具有生物活性,能够的模拟体内环境,包括各种信号分子,细胞外基质,能够促进细胞增殖、分化,从而引导组织再生。

本文旨在构建肝细胞特异性的三维仿生活性支架,用于肝细胞培养,模拟体内肝细胞的生长环境,优化体外肝细胞培养系统,提高肝细胞代谢功能,优化生物人工肝支持系统。以壳聚糖,透明质酸为原料,以肝实质细胞表面脱唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)的配体-半乳糖基团以共价键合修饰透明质酸,合成半乳糖化透明质酸,再通过冷冻干燥法制备了壳聚糖-半乳糖化透明质酸三维多孔支架。通过红外,元素分析,及X射线光电子能谱表征半乳糖基团对透明质酸的修饰,并考察了支架的形态,亲水性和力学性能。通过细胞在材料表面的黏附,支架中的细胞形态及特异性肝功能的表达表征支架对于细胞的相容性。

实验结果表明支架中半乳糖化透明质酸的添加改善了支架的亲水性,增加了三维支架的柔韧性,半乳糖基团的引入为肝细胞提供了贴附位点,提高了肝细胞的贴附率,有利于体外培养肝细胞类肝组织结构的形成和分化功能的表达。以壳聚糖-半乳糖化透明质酸支架为基础,通过物理吸附和化学交联方法结合肝素制备壳聚糖-半乳糖化透明质酸-肝素复合支架,并通过红外,扫描电镜,XPS等手段对复合支架进行表征。

参考文献

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[3]Gene delivery strategies for cartilage tissue engineering[J].Anita Saraf,Antonios G.Mikos.Advanced Drug Delivery Reviews.2006(4)

[4]Natural polymers for gene delivery and tissue engineering[J].Jiyoung M.Dang,Kam W.Leong.Advanced Drug Delivery Reviews.2006(4)

[5]Cardiovascular gene delivery:The good road is awaiting[J].L.P.Brewster,E.M.Brey,H.P.Greisler.Advanced Drug Delivery Reviews.2006(4)

[6]范晋勇.用于肝组织工程三维多孔活性支架的构建研究[D].天津大学,2009.