大鼠膀胱组织提取物的应用

背景^[1-6]

大鼠膀胱组织提取物是大鼠膀胱组织提取产物包含大鼠膀胱组织不同种类的细胞可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

空虚的膀胱呈三棱椎体形，分尖、体、底和颈四部。膀胱尖朝向前上方，由此沿腹前壁至脐之间有一褶襞为脐正中韧带。膀胱尖与膀胱底之间为膀胱体。膀胱的最下部为膀胱颈，与男性的前列腺和女性的盆膈相毗邻。膀胱是储存尿液的的肌性囊状器官，其形状、大小、位置和壁的厚度随尿液充盈程度而异。

通常成人的膀胱容量平均为350-500毫升，超过500毫升时候，因膀胱壁张力过大而产生疼痛。膀胱的容量为800毫升，新生儿的膀胱容量约为成人的十分之一，女性的容量小于男性，老年人因膀胱肌张力低而容量增大。膀胱内面被覆盖粘膜，当膀胱壁收缩时，粘膜聚集成皱襞称膀胱襞。

而在膀胱底内面，有一个三角形的区域，位于左、右输尿管口和尿道内口之间，此处膀胱粘膜与肌层紧密相连，缺少粘膜下层组织，无论膀胱扩张或者收缩，始终保持平滑，称为膀胱三角。膀胱三角是肿瘤、结核、炎症的好发部位，膀胱镜检查时应该特别注意。两个输尿管口之间的皱襞称输尿管间襞，膀胱镜下所见为一苍白带，是临床上寻找输尿管口的标志。在男性尿道口后方的膀胱三角处，受前列腺中叶推挤形成纵脊状隆起称膀胱垂。

应用^[7][8]

大鼠膀胱组织提取物可用于自噬在大鼠脊髓损伤后神经源性膀胱不同时间点表达的机制研究：

自噬在大鼠脊髓损伤后神经源性膀胱不同时间点的表达研究目的:建立大鼠脊髓损伤模型,观察自噬在脊髓损伤后神经源性膀胱不同时间点膀胱逼尿肌中的表达。

研究方法:36只雄性Wistar大鼠随机分为脊髓损伤组和假手术组。对照组只接受T10-T11水平的椎板切除术,而不损伤脊膜;实验组大鼠采用改良的Allen’s法进行脊髓损伤的手术。两组均在术后1天、4天和14天进行运动评分和膀胱功能评估。在每一个时间点,每组都随机选出6只实验动物被处死,取材。使用BBB功能评定量表评定大鼠的运动功能情况;使用膀胱残余尿量和膀胱功能评分评估大鼠膀胱功能;Western blotting检测大鼠膀胱组织中的LC3蛋白表达;应用免疫荧光法检测自噬相关指标LC3、P62,观察其阳性细胞表达;实时荧光定量RT-PCR对大鼠膀胱组织检测自噬活动相关基因LC3、P62 mRNA水平。

实验发现,脊髓损伤组大鼠术后双下肢功能丧失,并拖地行走,但是从术后1天开始,大鼠下肢功能逐渐恢复。脊髓损伤组大鼠术后膀胱功能出现障碍,但是随着时间逐渐有所恢复。Western blot结果显示,与假手术组相比,脊髓损伤组大鼠逼尿肌LC3-Ⅱ蛋白表达显著增高(P<0.01),而且在术后4天达到最高值。免疫荧光染色结果显示在术后1天、4天、14天,脊髓损伤组逼尿肌LC3-Ⅱ的表达较假手术组明显在增加(P<0.05)。同时,术后1天,脊髓损伤组逼尿肌P62有表达,但是术后4天较假手术组表达减少,并持续到术后14天。

RT-PCR结果显示,在术后1天、4天、14天脊髓损伤组逼尿肌LC3mRNA表达较假于术组明显增加,结果显示在术后4天,术后4天脊髓损伤组大鼠膀胱逼尿肌LC3mRNA的表达较术后1天明显增加,但是术后14天脊髓损伤组大鼠膀胱逼尿肌LC3mRNA的表达较术后4天有所减少:RT-PCR结果显示,术后1天,脊髓损伤组大鼠膀胱逼尿肌P62mRNA表达与假手术组相比无明显差别;术后4天和术后14天,脊髓损伤组大鼠膀胱逼尿肌P62mRNA表达与假手术组相比明显减少,但是,术后14天脊髓损伤组大鼠膀胱逼尿肌P62mRNA表达较术后4天有所增加。

参考文献

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[2]Urological Surveillance and Medical Complications after Spinal Cord Injury in the United States[J].Anne P.Cameron,Julie Lai,Christopher S.Saigal,J.Quentin Clemens.Urology.2015(3)

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[5]Early and Sustained Activation of Autophagy in Degenerating Axons after Spinal Cord Injury[J].Vinicius Toledo Ribas,Bianca Schnepf,Malleswari Challagundla,Jan Christoph Koch,Mathias B?hr,Paul Lingor.Brain Pathology.2015(2)

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[8]曾凡硕.自噬在大鼠脊髓损伤后神经源性膀胱不同时间点表达的机制研究[D].山东大学,2017.