人小梁网细胞提取物的应用

背景^[1-4]

人小梁网细胞分离自眼球组织；小梁网又称滤帘、小带、房角网状组织。位于前、后境界线之间，为宽度0.5毫米的环形多层海绵状结构，由排列不甚规则之小梁带组成。每个小梁带均有圆形或椭圆形小孔，为一种粘多糖所包埋，并有一精细的神经轴突丛。小梁网位巩膜内沟内，其后2/3构成Schlemm氏管的内侧壁和房角的外壁。于子午线切面上呈三角形，三角形的尖端位于角膜后弹力层的止点和附近的角膜板层，此处稍隆起(即Schwalbe氏线)；底部和巩膜突与睫状体前面相连接；内侧作为前房角的外界；外侧同角巩膜邻接，且包围着Schlemm氏管构成其内壁。

人小梁网细胞在眼内压调节中起着关键作用；小梁网细胞内有特定的神经递质和神经肽受体，其中包括肾上腺素、乙酰胆碱和神经肽Y。青光眼是由于眼内压力升高而造成的一种不可逆致盲眼病，小梁网细胞的体外培养是青光眼病因学研究的重要手段之一。在小梁网细胞中，一长串的血管活性多肽和生长因子能够触发细胞内信号传导机制，小梁网细胞可合成不同类型的细胞外基质蛋白以及金属蛋白酶。

形态学观察可见，刚从组织块长出的原代细胞，形态各异，多数呈星状或不规则形。细胞有胞突，核椭圆形，胞体肥大，胞浆丰富，且可见吞噬颗粒。随着细胞的增生及相互融合为单层，细胞的形态趋于一致。胞浆的色素颗粒及胞突消失，排列紧密呈类似上皮细胞的扁椭圆形或不规则形。胞体透亮，包膜清晰。人小梁网细胞采用组织贴块法制备而来，细胞总量约为5×10^5cells/瓶；细胞纯度可达85%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

应用^[5][6]

可用于miR-184通过抑制HIF-1α调控人小梁网细胞生长、凋亡及氧化应激所致细胞毒性的研究：

通过体外培养人小梁网细胞,并模拟氧化应激损伤,探究miR-184调控人小梁网细胞生长、凋亡及氧化应激所致细胞毒性的分子机制,为早日发现治疗青光眼的治疗靶点提供理论基础。青光眼由于眼压增高而引起视盘（曾称视乳头）凹陷、视野缺损,最终可以导致失明的严重眼病。正常人的眼压为10～21mmHg（Schitz眼压计）,超过24mmHg为病理现象。眼压增高可以导致视功能损害,视盘出现大而深的凹陷,视野可见青光眼性典型改变。眼压增高持续时间愈久,视功能损害愈严重。

青光眼常常伴随着氧化应激反应,视网膜神经节细胞的凋亡,细胞外基质成分的改变,视神经萎缩以及由眼内压升高导致的视觉缺失等症状。小梁网结构的减少会导致眼内压的上升,当小梁网结构增多时有利于眼内压的降低,这表明小梁网结构在调控眼内压,防止视神经损伤的过程中发挥着重要的作用。人小梁网细胞被广泛的用作体外青光眼疾病研究模型。

目前,越来越多的研究结果显示活性氧引起的氧化应激反应是一种在神经退行性疾病中普遍存在的现象,并且氧化应激反应在青光眼的发生发展过程中起着十分重要的作用。氧化应激反应引起的线粒体DNA损伤及视网膜色素细胞内的基因表达调控紊乱,能够引发包括老年性黄斑变性在内的多种视神经疾病。微小RNAs（micro-RNAs,miRNAs）是近年来发现的一类长度介于18～25 nt的单链内源性非编码小RNA,miRNA序列具有高度保守性,并在不同的物种间起着相似的作用,主要在转录后水平抑制靶基因的表达,是通过识别靶基因的特异性序列来实现其降低靶基因表达的主要功能,了解这些分子调节与青光眼损伤的相关机制可能有助于将来实现microRNA靶向抑制青光眼性损伤的目标。

越来越多的研究表明,microRNA在青光眼的发生发展的过程中发挥着重要调节作用,譬如miR-29家族,miR-204,miR-24,以及miR-184。miR-184最早由Lagos-Quintana等在小鼠心脏和小脑中发现,定位在9号染色体上,miR-184在局部缺血性疾病对血管新生具有显著的调节作用,通过与其靶标VEGF和IGF-2结合,抑制VEGF和IGF-2表达,从而减少新生血管的生成。miR-184在舌鳞状细胞癌、恶性胶质瘤等多种肿瘤的发生发展过程中也发挥着重要的作用。

参考文献

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[6]王佃科.miR-184通过抑制HIF-1α调控人小梁网细胞生长、凋亡及氧化应激所致细胞毒性的研究[D].山东大学,2017.