木兰箭毒碱的含量测定

发布日期:2020/10/18 17:56:53

背景及概述^[1]

厚朴为木兰科植物厚朴MagnoliaofficinalisRehd.etWils.或凹叶厚朴M.officinalisRehd.etWils.subsp.biloba(Rehd.etWils.)ChengetLaw的干燥干皮、根皮和枝皮。厚朴中主要有效成分为酚类和生物碱如木兰箭毒碱。

含量测定^[1]

1）色谱条件：LichrospherC18(250mm×4.6mm，5μm，江苏汉邦)色谱柱；流动相：甲醇-水-三乙胺(50∶50∶0.2，磷酸调pH至3.5)；体积流量0.8mL/min；检测波长282nm；柱温为室温；进样量10μL。

2）对照品溶液的制备：称取厚朴碱（木兰箭毒碱）对照品适量，精密称定，置50mL量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，制成厚朴碱（木兰箭毒碱）质量浓度为250μg/mL的溶液，作为对照品溶液。

3）供试品溶液的制备：取厚朴粉末1.0g，精密称定，置三角瓶中，加20mL盐酸溶液(pH2)，超声提取20min。提取液转移至50mL量瓶中，蒸馏水洗涤残渣3次，每次5mL，合并洗涤液，用蒸馏水定容至50mL，摇匀。经0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，备用。

4）标准曲线的绘制：分别精密量取对照品溶液0.5、1.0、2.0、4.0、8.0mL，置10mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。经0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液进样10μL。在上述色谱条件下进行分析，记录色谱图。以对照品峰面积为纵坐标(Y)，以质量浓度为横坐标(X)绘制标准曲线，回归方程为Y=4.18×106X+1.82×104(r=0.9992)。结果表明，厚朴碱（木兰箭毒碱）在12.5～200.0μg/mL线性关系良好。

5）精密度试验：吸取同一浓度对照品溶液，在上述色谱条件下重复进样6次，测得厚朴碱（木兰箭毒碱）峰面积，计算RSD为0.8%。

6）重现性试验：称取同一样品(No.6)6份，每份1.0g，精密称定，按2.3项下操作，在上述色谱条件下进行HPLC分析，测得厚朴碱（木兰箭毒碱）的质量分数，计算RSD为2.6%。

7）稳定性试验：取一份样品溶液(No.6)分别在1、2、4、8、16、24h测定。结果表明，供试品溶液在24h内稳定性良好，厚朴碱（木兰箭毒碱）峰面积RSD为1.5%。

8）回收率试验：称取已知量的厚朴样品(No.6)9份，每份0.5g，精密称定，分别精密加入一定量的对照品，按2.3项下操作，在上述色谱条件下进行HPLC分析，平均回收率98.5%，RSD为1.3%。2.9样品的测定：取厚朴样品，按2.3项下操作，在上述色谱条件下进行HPLC分析，按外标一点法计算厚朴碱的量。测定结果见代表性色谱图见图1。