多根乌头碱的制备方法

背景及概述^[1]

草乌(AconitikusnezoffiiRadix)为毛茛科植物北乌头的干燥块根，民间药用历史悠久，常用于治疗风湿、麻痹、寒疝、疼痛等症状。草乌的主要生物活性成分为二萜类生物碱，多根乌头碱是其活性物质之一。它们既是药材中主要的药效成分，同时又是毒性很强的成分，用药不当易造成中毒现象。因此，为保证用药安全，有必要弄清草乌中所有生物碱类成分的种类并通过含量测定严格控制药材中此类生物碱成分的含量。

结构

制备方法^[1]

(一)提取

取干燥的草乌10kg，粉碎，以氯仿-氨水溶液(20：1)为流动相渗漉提取，将提取液浓缩，用0.5％的HCl酸化至pH＝1～2，氯仿萃取4次，将水层合并、浓缩，再用0.5％的NaOH碱化至pH＝11～12，氯仿萃取4次，取氯仿层合并、浓缩，得粗提取物310g。

(二)分离及纯化

将粗提取物(310g)进行硅胶柱层析，以洗脱剂1～5为流动相梯度洗脱，薄层色谱(TLC)检测，合并相同组分，减压回收溶剂，得到三个部分，通过检测TCL其中部分含有准噶尔乌头碱，第二部分含有准噶尔乌头胺，第三部分含有新乌头碱。将部分(40g)进行硅胶柱层析，以洗脱剂7～10为流动相梯度洗脱，TLC检测，合并相同组分，减压回收溶剂，得到A(10g)、B(5g)两个部分。再将A部分进行硅胶柱层析，以8、9、10为流动相梯度洗脱，TLC检测，合并相同组分，减压回收溶剂，析出白色粉末即为化合物cw-1(2.0g)；将母液浓缩，进行硅胶柱层析，得到白色粉末即为化合物cw-6(860mg)。将B部分进行硅胶柱层析，以8、9、10为流动相梯度洗脱，TLC检测，合并相同组分，减压回收溶剂，白色沉淀用石油醚和丙酮的混合溶液结晶、重结晶，得到无色块状结晶即为化合物cw-3(1.0g)。将第二部分(35g)进行硅胶柱层析，以洗脱剂6～9为流动相梯度洗脱，TLC检测，合并相同组分，减压回收溶剂，得到C(9.4g)、D(3.0g)两个部分。再将C部分进行硅胶柱层析，以6、8、9为流动相梯度洗脱，TLC检测，合并相同组分，减压回收溶剂，得到化合物cw-7(白色粉末，560mg)和C-1(5.2g)部分。再将C-1部分进行硅胶柱层析，以洗脱剂6、8、9为流动相梯度洗脱，TLC检测，合并相同组分，减压回收溶剂，白色沉淀用石油醚和丙酮的混合溶液结晶、重结晶，得到无色粒状结晶即为化合物cw-5(200mg)。

将D部分进行硅胶柱层析，以洗脱剂6、8、9、10为流动相梯度洗脱，TLC检测，合并相同组分，减压回收溶剂，白色沉淀用石油醚和丙酮的混合溶液结晶、重结晶，得到无色块状结晶即为化合物cw-2(550mg)。将第三部分(42g)进行硅胶柱层析，以洗脱剂6、8、9、11为流动相梯度洗脱，TLC检测，合并相同组分，减压回收溶剂，得到E(17g)部分。再将E部分进行硅胶柱层析，以洗脱剂7～10为流动相梯度洗脱，TLC检测，合并相同组分，减压回收溶剂，得到化合物cw-8(白色粉末，4.0g)和E-1(5.0g)部分。再将E-1部分进行硅胶柱层析，以洗脱剂7～10为流动相梯度洗脱，TLC检测，合并相同组分，减压回收溶剂，白色沉淀用石油醚和丙酮的混合溶液结晶、重结晶，得到无色粒状结晶即为化合物多根乌头碱(70mg)。

主要参考资料

[1] CN201410348232.6草乌中准噶尔乌头碱的HPLC-ELSD含量测定方法